公开(公告)号：CN119220567A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411339082.2

申请日：2024-09-25

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  李冬雪 ,  张新朋 ,  刘凤华 ,  余蕾 ,  王娅 ,  毛妃凤 ,  马悦 ,  江仕龙 ,  宋宝安

IPC: C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12N15/80 ,  A01N43/54 ,  A01N57/16 ,  A01P3/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了DspckA在调控Didymella segeticola致病力和作为杀菌剂靶标中的应用。本发明DspckA基因来源于D.segeticola，通过构建DspckA基因的敲除基因片段，并将其导入D.segeticola原生质体中得到敲除突变体。实验发现DspckA基因在D.segeticola的致病力和对宁南霉素的敏感性中具有作用。通过分子对接分析和微量热泳动实验证明DspckA蛋白可以作为杀菌剂靶标，且与宁南霉素具有相互作用，且T264、T265和E306位氨基酸为关键结合位点。本发明DspckA可作为杀菌剂靶标和病害致病机制的关键蛋白，在植物病原真菌病害的防治中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN117965312A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202310259351.3

申请日：2023-03-17

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  张骏 ,  宋宝安 ,  赵永田 ,  李冬雪 ,  廖康岑 ,  刘凤华 ,  谢文静 ,  潘田欣宜

IPC: C12N1/14 ,  C12N1/00 ,  C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6895 ,  G01N21/64 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种PEG介导高粱附球菌原生质体的制备和转化方法，属于生物技术领域。原生质体的制备和转化方法包括将高粱附球菌培养5d后，用灭菌水冲洗转至CM液体培养基中摇培；然后采用崩溃酶和溶壁酶的混合酶解液对菌丝进行酶解、过滤、离心，即得到高粱附球菌原生质体。再将质粒pCT74通过PEG介导，转化至高粱附球菌原生质体中，获得含有质粒pCT74的高粱附球菌。本发明实现了PEG介导高粱附球菌原生质体的遗传转化，构建了一套针对该病原菌的高效快速的遗传转化体系，获得持续表达的绿色荧光蛋白以及稳定遗传的转化子，有助于高粱附球菌致病机制、寄主抗病机制、病原寄主互作机制、农药活性评价及农药作用机制的研究。

公开(公告)号：CN119570832A

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202411330935.6

申请日：2024-09-24

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  马友力 ,  刘凤华 ,  黄煜 ,  穆小容 ,  谢文静 ,  黎佩荧 ,  江仕龙 ,  余蕾 ,  王娅 ,  马悦 ,  宋宝安

IPC: C12N15/80 ,  C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  G01N27/447 ,  A01P3/00 ,  A01N43/54 ,  G16C20/50 ,  G16B15/30 ,  G16B25/10 ,  G16C10/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了苏氨酸脱水酶在调控Didymella segeticola生长和作为杀菌剂靶标中的应用。本发明苏氨酸脱水酶基因Td来源于Didymella segeticola，通过构建Td基因的敲除基因片段，并将其导入D.segeticola原生质体中得到敲除突变体。实验发现Td基因在D.segeticola的生长、体内丙酮酸含量、体内ATP含量和对武夷菌素的敏感性中具有作用。通过分子对接分析、分子动力学模拟和微量热泳动实验证明苏氨酸脱水酶可以作为杀菌剂靶标，并筛选得到杀菌剂武夷菌素。本发明苏氨酸脱水酶可作为杀菌剂靶标和病害致病机制的关键蛋白，在植物病原真菌病害的防治中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN119101137A

公开(公告)日：2024-12-10

申请号：CN202411097500.1

申请日：2024-08-12

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  谢文静 ,  李冬雪 ,  刘凤华 ,  李春萍 ,  江仕龙 ,  王娅 ,  毛妃凤 ,  余蕾 ,  马悦 ,  宋宝安

IPC: C07K14/37 ,  C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了LtPCL6蛋白及其编码基因在调控可可毛色二孢致病力、菌丝生长及抗逆境中的应用。本发明LtPCL6蛋白编码基因来源于可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae)，通过构建可可毛色二孢LtPCL6基因的敲除基因片段，并将其导入可可毛色二孢原生质体中得到敲除突变体。实验发现LtPCL6基因在可可毛色二孢的生长、细胞壁和细胞膜完整性以及抗逆境能力中具有作用，并显著降低可可毛色二孢对寄主的致病力。因此，LtPCL6可作为杀菌剂靶标和病害致病机制的关键蛋白研发可可毛色二孢侵染所致病害的药剂和培育抗病新品种，在植物病原真菌病害的防治中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN118226019A

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202410206509.5

申请日：2024-02-26

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  马友力 ,  李春萍 ,  马悦 ,  刘凤华 ,  谢文静 ,  汪先素 ,  张东琴 ,  潘田欣宜 ,  张新朋 ,  宋宝安

IPC: G01N33/53 ,  C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种筛选防治植物真菌性病害病原Didymella segeticola的杀菌剂作用靶标，所述的靶标是病原菌D.segeticola的硝酸还原酶(nitrate reductase，NR)。本发明还提供一种对病原菌D.segeticola的NR作为筛选防治植物真菌性病害病原D.segeticola的杀菌剂作用机制及其应用。

公开(公告)号：CN117866776A

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202311449709.5

申请日：2023-11-02

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  廖康岑 ,  李冬雪 ,  赵永田 ,  刘凤华 ,  马悦

IPC: C12N1/14 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种Didymella segeticola菌丝原生质体的制备方法，属于生物技术领域。原生质体的制备方法包括将D.segeticola菌丝培养约7d，采用灭菌蒸馏水清洗，并转至YEPD液体培养基中培养；然后采用崩溃酶、溶壁酶和蜗牛酶的混合酶解液对菌丝进行酶解、过滤、离心，即得到D.segeticola菌丝原生质体。本发明表明D.segeticola的菌丝原生质体可为研究该菌的致病机制及杀菌剂创制提供重要的实验材料。

公开(公告)号：CN119120539A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411285792.1

申请日：2024-09-13

Applicant: 贵州大学

Inventor： 陈卓 ,  李冬雪 ,  张新朋 ,  刘凤华 ,  余蕾 ,  王娅 ,  毛妃凤 ,  马悦 ,  江仕龙 ,  宋宝安

IPC: C12N15/80 ,  C12N9/14 ,  C12N15/55 ,  C12N15/90 ,  C12N1/15 ,  G01N33/68 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了DsHAD基因在调控Didymella segeticola生长、繁殖、致病力和抗逆境中的应用。DsHAD基因来源于Didymella segeticola，通过构建D.segeticola的DsHAD基因的敲除基因片段，并将其导入D.segeticola原生质体中得到敲除突变体。实验发现DsHAD基因在D.segeticola的生长、繁殖和抗逆境能力中具有作用，并显著降低D.segeticola对茶树叶片的致病力。因此，DsHAD可作为杀菌剂靶标和病害致病机制的关键蛋白，用于研发由D.segeticola侵染所致病害的药剂和培育抗病的植物新品种，在植物病原真菌病害的防治中具有广阔的应用前景。