tbc1d14基因过表达腺病毒、载体及构建和包装方法

    公开(公告)号:CN108103101A

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201711373209.2

    申请日:2017-12-19

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明公开了tbc1d14基因过表达腺病毒载体,以pHBAd‑EF1‑MCS‑GFP为载体,整合连接tbc1d14基因,进行重组,得到tbc1d14基因过表达腺病毒载体。本发明还公开了上述腺病毒载体的构建方法、腺病毒的包装方法及获得的腺病毒。本发明采用了腺病毒表达系统,用同源重组的方法将外源基因小鼠tbc1d14基因构建至腺病毒骨架载体上,构建重组腺病毒Ad‑tbc1d14,从而获得高滴度的重组腺病毒,是目前最高效可靠且最稳定的小鼠tbc1d14基因表达系统,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达小鼠tbc1d14目的蛋白,从而为研究tbc1d14基因在细胞自噬过程中的生物学功能做铺垫。

    沉默荣昌猪CD14表达的siRNA及筛选方法与应用

    公开(公告)号:CN108977444A

    公开(公告)日:2018-12-11

    申请号:CN201810689608.8

    申请日:2018-06-28

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明公开的一种沉默荣昌猪CD14表达的siRNA,通过先建立稳定表达荣昌猪CD14基因的CD14-增强型绿色荧光蛋白EGFP融合蛋白的猪肺泡巨噬细胞;然后合成四条位点不同的靶向CD14基因的siRNAs,再应用高效转染试剂将四条siRNAs,转染CD14-EGFP稳定细胞系;最后筛选出能高效抑制荣昌猪CD14基因表达的siRNAs,即第3条(669)siRNAs能够明显抑制荣昌猪CD14基因的表达,为开展靶向荣昌猪CD14的基因治疗荣昌猪内毒素休克、内毒素血症以及格兰氏阴性菌导致的炎症性疾病的相关研究提供了的理论依据。

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