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公开(公告)号:CN107937400A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711241866.1
申请日:2017-11-30
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , A61K31/713 , A61P31/16
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N15/65 , C12N15/85 , C12N2310/14 , C12N2800/107 , C12Q1/6897 , C12Q2525/207
Abstract: 本发明公开的沉默NS1基因表达的小核糖核酸分子,通过建立稳定表达H5N1型禽流感病毒NS1-表达增强型绿色荧光蛋白EGFP的人胚肾293细胞系,合成4条靶向NS1基因不同位点的siRNA,并转染该稳定细胞系;通过实时荧光定量聚合酶链式反应、流式细胞术以及Western-blot检测siRNA的沉默效果,最终筛选出沉默NS1基因表达效果最好的siRNA(299)。本发明为后续研究H5N1型禽流感病毒NS1基因在感染及致病中的分子机制和进一步应用核糖核酸干扰技术通过抑制H5N1型禽流感病毒NS1基因的表达奠定了重要基础,有很好的实用价值。
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公开(公告)号:CN116949077A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202211323103.2
申请日:2022-10-27
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/70 , C07K19/00 , C07K16/12 , C12N15/861 , C12Q1/6869 , C12Q1/6888 , G16B30/00 , G16B25/10
Abstract: 本发明属于多克隆抗体技术领域,公开了一种原核表达、多克隆抗体、重组腺病毒及表达谱分析方法,利用重组腺病毒介导羊种布鲁氏菌wbkC蛋白在RAW264.7细胞中过表达,运用转录组测序技术分析羊种布鲁氏菌wbkC蛋白影响RAW264.7细胞的lncRNA表达谱;通过GO和KEGG功能富集性分析,预测羊种布鲁氏菌wbkC蛋白影响RAW264.7细胞自噬的关键内源性lncRNA。本发明通过分析B.melitensis wbkC蛋白,影响RAW264.7细胞自噬的关键内源性lncRNA,为进一步分析B.melitensis利用宿主细胞的自噬功能,实现胞内存活的机制提供了新思路。
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公开(公告)号:CN108048383A
公开(公告)日:2018-05-18
申请号:CN201711430173.7
申请日:2017-12-26
Applicant: 西南大学
Abstract: 发明提供一株羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis,B.melitensis)M5‑90‑Δper,所述菌是用卡那霉素抗性基因替换羊种布鲁氏菌M5‑90的per基因编码区构建得到的。本发明以羊种布鲁式菌M5‑90为出发菌株,以其基因组为模板,通过扩增per基因上、下游同源臂,同时利用卡那霉素抗性基因替换per基因编码区,构建pGEM‑Δper同源重组质粒,将该质粒电转化羊种布鲁式菌M5‑90感受态细胞,所得阳性转化子即为per基因缺失的羊种布鲁式菌M5‑90‑Δper。本发明的M5‑90‑Δper株为布鲁氏菌介导的细胞自噬与感染机制奠定了重要基础。
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公开(公告)号:CN114821579A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210393985.3
申请日:2022-04-15
Applicant: 西南大学
IPC: G06V20/69 , G06V10/30 , G06V10/28 , G06V10/20 , G06T7/194 , G06T7/187 , G06T7/155 , G06T5/20 , G06T5/00
Abstract: 本发明属于细胞生物学、免疫学技术及智能图像处理技术领域,公开了一种布鲁氏菌介导巨噬细胞自噬小体和自噬溶酶体的图像人工智能识别方法,将布鲁氏菌感染巨噬细胞24h的样品,进行固定、漂洗、脱水、包埋、固化、切片、染色后,用透射电镜进行拍照;对拍到的显微图像进行空间域滤波处理,使用全局阈值将显微图像进行二值化处理;再对二值化显微图像进行形态学处理;最后统计显微图像中的自噬小体和自噬溶酶体个数。本发明对布鲁氏菌介导巨噬细胞自噬后,巨噬细胞中自噬小体和自噬溶酶体个数的计数方法效率高、正确率高。相比与人工计数的方式,智能图像处理技术能够更快更好地性识别超过1个数量级的照片,更准确地量化细胞自噬的程度。
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公开(公告)号:CN108103101A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201711373209.2
申请日:2017-12-19
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了tbc1d14基因过表达腺病毒载体,以pHBAd‑EF1‑MCS‑GFP为载体,整合连接tbc1d14基因,进行重组,得到tbc1d14基因过表达腺病毒载体。本发明还公开了上述腺病毒载体的构建方法、腺病毒的包装方法及获得的腺病毒。本发明采用了腺病毒表达系统,用同源重组的方法将外源基因小鼠tbc1d14基因构建至腺病毒骨架载体上,构建重组腺病毒Ad‑tbc1d14,从而获得高滴度的重组腺病毒,是目前最高效可靠且最稳定的小鼠tbc1d14基因表达系统,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达小鼠tbc1d14目的蛋白,从而为研究tbc1d14基因在细胞自噬过程中的生物学功能做铺垫。
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公开(公告)号:CN107854508A
公开(公告)日:2018-03-30
申请号:CN201711275341.X
申请日:2017-12-06
Applicant: 西南大学
IPC: A61K36/32 , A61P1/16 , C12N1/20 , C12R1/01 , A61K35/741
CPC classification number: A61K36/32 , A61K35/741 , C12N1/20 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开了一种缓解酒精肝损伤的组合物,包括鼠李糖杆菌液和橄榄汁的混合物。橄榄汁通过将新鲜的青橄榄去皮、清洗、去核、匀浆、离心、过滤得到,鼠李糖杆菌液取含有鼠李糖杆菌的菌粉,先在液体培养基中培养,再接种至固体培养基中38℃培养24h,传代三次得纯菌,最后移入液体培养基即得。本发明组合物通过天然提取物和益生菌配伍,对机体无任何副作用,可逆转酒精性肝损失模型小鼠的翻正反射,并降低血液中反映肝细胞损失指标谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性,达到解酒护肝的效果。
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公开(公告)号:CN107854508B
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN201711275341.X
申请日:2017-12-06
Applicant: 西南大学
IPC: A61K36/32 , A61P1/16 , C12N1/20 , C12R1/01 , A61K35/741
Abstract: 本发明公开了一种缓解酒精肝损伤的组合物,包括鼠李糖杆菌液和橄榄汁的混合物。橄榄汁通过将新鲜的青橄榄去皮、清洗、去核、匀浆、离心、过滤得到,鼠李糖杆菌液取含有鼠李糖杆菌的菌粉,先在液体培养基中培养,再接种至固体培养基中38℃培养24h,传代三次得纯菌,最后移入液体培养基即得。本发明组合物通过天然提取物和益生菌配伍,对机体无任何副作用,可逆转酒精性肝损失模型小鼠的翻正反射,并降低血液中反映肝细胞损失指标谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性,达到解酒护肝的效果。
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公开(公告)号:CN108977444A
公开(公告)日:2018-12-11
申请号:CN201810689608.8
申请日:2018-06-28
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , A61K31/713 , A61P39/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开的一种沉默荣昌猪CD14表达的siRNA,通过先建立稳定表达荣昌猪CD14基因的CD14-增强型绿色荧光蛋白EGFP融合蛋白的猪肺泡巨噬细胞;然后合成四条位点不同的靶向CD14基因的siRNAs,再应用高效转染试剂将四条siRNAs,转染CD14-EGFP稳定细胞系;最后筛选出能高效抑制荣昌猪CD14基因表达的siRNAs,即第3条(669)siRNAs能够明显抑制荣昌猪CD14基因的表达,为开展靶向荣昌猪CD14的基因治疗荣昌猪内毒素休克、内毒素血症以及格兰氏阴性菌导致的炎症性疾病的相关研究提供了的理论依据。
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