公开(公告)号：CN109576304A

公开(公告)日：2019-04-05

申请号：CN201811445445.5

申请日：2018-11-29

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 刘旭 ,  王英美 ,  张涌

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66 ,  C12N15/907

Abstract: 本发明公开了一种通用型转录组编辑载体及其制备方法，对Cas13d基因进行序列优化，并且对Cas13d进行点突变，使HEPN失活；在pCas13d-gRNA的多克隆位点处定向插入靶向目的基因的guide RNA序列，在guide RNA的辅助作用下将Cas13d蛋白定点结合到特定的目的基因序列上；利用Cas13d蛋白结合在剪接受体的作用，进行转录组编辑。本发明基于CRISPR-Cas13d，将HEPN无活性的dCas13d设计为灵活的RNA结合模块以靶向特定的RNA元件，实现基因组编辑并且不扰乱蛋白质翻译，为RNA研究提供了一个通用工具。