一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN113528566B

    公开(公告)日:2022-12-20

    申请号:CN202110621586.3

    申请日:2021-06-03

    Abstract: 本发明涉及一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用,该酵母菌重组表达载体含有表达框,所述表达框依次包括位于同一顺反子的待表达目的蛋白的基因、蛋白酶酶切位点的编码序列与抗生素抗性基因;所述蛋白酶酶切位点能够被酵母菌中的蛋白酶特异性识别并切割。本发明还提供了该酵母菌重组表达载体的构建方法及其在筛选高表达目的蛋白的重组酵母菌方面的应用。通过应用本发明的技术方案,可以快速、高通量地筛选得到高表达目的蛋白的重组酵母菌,与现有技术相比,显著减少了复筛时间,降低了假阳性率,提高了筛选效率。

    一种(R)-3-氨基丁酸的合成与纯化方法

    公开(公告)号:CN113789311B

    公开(公告)日:2022-11-04

    申请号:CN202110882949.9

    申请日:2021-08-02

    Abstract: 本发明涉及一种(R)‑3‑氨基丁酸的合成与纯化方法。本发明首先提供一种新的氨基转移酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,该酶在不需要添加铵盐的情况下,即可有效催化巴豆酸合成(R)‑3‑氨基丁酸;本发明还提供一种高密度发酵方法,能使表达该氨基转移酶的工程菌在短时间内实现高密度生长,并且实现氨基转移酶的高效表达;本发明还提供一种(R)‑3‑氨基丁酸的分离和纯化方法,无需复杂的不同级别的膜处理设备,即可简单高效地获得纯度高于99%的(R)‑3‑氨基丁酸。

    一种(R)-3-氨基丁酸的合成与纯化方法

    公开(公告)号:CN113789311A

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN202110882949.9

    申请日:2021-08-02

    Abstract: 本发明涉及一种(R)‑3‑氨基丁酸的合成与纯化方法。本发明首先提供一种新的氨基转移酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,该酶在不需要添加铵盐的情况下,即可有效催化巴豆酸合成(R)‑3‑氨基丁酸;本发明还提供一种高密度发酵方法,能使表达该氨基转移酶的工程菌在短时间内实现高密度生长,并且实现氨基转移酶的高效表达;本发明还提供一种(R)‑3‑氨基丁酸的分离和纯化方法,无需复杂的不同级别的膜处理设备,即可简单高效地获得纯度高于99%的(R)‑3‑氨基丁酸。

    一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN113528566A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110621586.3

    申请日:2021-06-03

    Abstract: 本发明涉及一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用,该酵母菌重组表达载体含有表达框,所述表达框依次包括位于同一顺反子的待表达目的蛋白的基因、蛋白酶酶切位点的编码序列与抗生素抗性基因;所述蛋白酶酶切位点能够被酵母菌中的蛋白酶特异性识别并切割。本发明还提供了该酵母菌重组表达载体的构建方法及其在筛选高表达目的蛋白的重组酵母菌方面的应用。通过应用本发明的技术方案,可以快速、高通量地筛选得到高表达目的蛋白的重组酵母菌,与现有技术相比,显著减少了复筛时间,降低了假阳性率,提高了筛选效率。

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