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公开(公告)号：CN108445130A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810219686.1
申请日：2018-03-16
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种精细筛选出奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的方法，具体涉及食品检测领域，该方法包括如下步骤：在样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇，并加入碘代乙酰胺，反应后得到待酶解样本溶液，且通过酶解得到酶解溶液。酶解溶液采用二甲基标记得到轻标溶液和重标溶液。将轻标溶液与重标溶液按质量比为1:1混合，采用纳流液相色谱串联Q-Exactive高分辨质谱鉴别得到候选肽段。采用超高性能液相色谱串联三重四级杆对可识别的质谱信息所对应的候选肽段进行相对定量分析，筛选出峰面积比的相对标准偏差
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公开(公告)号：CN110007019A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910249510.5
申请日：2019-03-29
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种同时定量检测母乳中三种抗体含量的方法，采用胰蛋白酶对母乳进行酶解，选择母乳中抗体酶解产生的多肽中的特异性多肽作为标志物，人工合成该特异性多肽作为标准物质，设计并合成同位素标记的特异性多肽作为内标，采用同位素稀释液相色谱串联质谱法对特异性多肽进行定量检测，然后换算得母乳中抗体的含量。本发明能同时定量检测母乳中三种抗体含量，稳定性好、定量准确、重复性好、特异性高。
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公开(公告)号：CN108445130B
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201810219686.1
申请日：2018-03-16
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种精细筛选出奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的方法，具体涉及食品检测领域，该方法包括如下步骤：在样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇，并加入碘代乙酰胺，反应后得到待酶解样本溶液，且通过酶解得到酶解溶液。酶解溶液采用二甲基标记得到轻标溶液和重标溶液。将轻标溶液与重标溶液按质量比为1:1混合，采用纳流液相色谱串联Q‑Exactive高分辨质谱鉴别得到候选肽段。采用超高性能液相色谱串联三重四级杆对可识别的质谱信息所对应的候选肽段进行相对定量分析，筛选出峰面积比的相对标准偏差
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公开(公告)号：CN108753929A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810370194.2
申请日：2018-04-24
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q1/06
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2531/125 , C12Q2565/629 , C12Q2525/205 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种微流体芯片及其改性方法和在检测食品细菌数量上的应用，包括：将微流体芯片上的微流管道内表面的–CH3基团改性为‑OH基团；再向微流管道内通入氨基硅烷试剂；干燥之后，向微流管道内通入表面经由‑COOH改性过的树枝状聚合物；将5’末端氨基化的适配体RCA的引物与其锁式探针的杂交连接产物嫁接到微流管道内表面上的树枝状聚合物上，其中锁式探针为待测目标致病菌的核酸适配体的互补序列，再将RCA反应试剂通入微流管道内，使适配体RCA启动生产串联长链适配体。本发明将两种不同功能的RCA反应结合使用，并采用树枝状聚合物对芯片内表面进行改性，提高检测过程中的目标识别抓取和信号增强，方便实现一体化检测。
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公开(公告)号：CN108426970A
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201810220045.8
申请日：2018-03-16
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
摘要： 本发明公开了通过考察候选肽段的酶解稳定性筛选出奶粉过敏蛋白的特征肽段的方法，具体涉及食品检测领域，该方法包括如下步骤：在样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇，并加入碘代乙酰胺，反应后得到待酶解样本溶液，且通过酶解得到酶解溶液。酶解溶液采用二甲基标记得到轻标溶液和重标溶液。将轻标溶液与重标溶液按质量比为1:1混合，采用纳流液相色谱串联Q-Exactive高分辨质谱鉴别得到候选肽段。采用超高性能液相色谱串联三重四级杆对可识别的质谱信息所对应的候选肽段进行相对定量分析，筛选出峰面积比的相对标准偏差
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公开(公告)号：CN107817311B
公开(公告)日：2019-08-23
申请号：CN201710886096.X
申请日：2017-09-27
申请人： 绿城农科检测技术有限公司 , 陈启
IPC分类号： G01N30/88
摘要： 本发明公开了一种液质联用检测配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量的方法，包括以下步骤：(1)在配方奶粉样品中加入质量浓度为10～70％的乙腈水溶液，提取得到配方奶粉中的标记肽，通过液质联用检测标记肽的含量，得到配方奶粉中标记肽含量；(2)采用与步骤(1)相同的方法提取所述配方奶粉样品中所使用的酪蛋白磷酸肽原料中的标记肽，通过液质联用检测标记肽的含量，得到酪蛋白磷酸肽原料中标记肽含量；(3)按照下列公式计算得到所述配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量，配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量＝配方奶粉中标记肽含量/酪蛋白磷酸肽原料中标记肽含量；其中，所述标记肽的序列为VLPVPQK。本发明可用于检测市场上大多数CPP产品。
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公开(公告)号：CN108445100A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810220056.6
申请日：2018-03-16
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的筛选方法，具体涉及食品检测领域，该方法包括如下步骤：在样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇，并加入碘代乙酰胺，反应后得到待酶解样本溶液，且通过酶解得到酶解溶液。酶解溶液采用二甲基标记得到轻标溶液和重标溶液。将轻标溶液与重标溶液按质量比为1:1混合，采用纳流液相色谱串联Q-Exactive高分辨质谱鉴别得到候选肽段。采用超高性能液相色谱串联三重四级杆对可识别的质谱信息所对应的候选肽段进行相对定量分析，筛选出峰面积比相对标准偏差
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公开(公告)号：CN107860934A
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201711035097.X
申请日：2017-10-30
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
CPC分类号： G01N35/00029 , B01L3/502707 , B01L2200/10 , B01L2200/12 , G01N2035/00158
摘要： 本发明公开了一种微流控芯片及其改性方法和在检测食品细菌数量上应用，所述改性方法包括以下步骤：(1)将微流控芯片上的微流管道内表面的–CH3基团改性为-OH基团；(2)所述步骤(1)反应完成之后，向所述微流管道内通入氨基硅烷试剂，进行氨基硅烷反应；(3)干燥之后，向所述微流管道内通入表面经由-COOH改性过的树状大分子，进行偶联反应；(4)所述步骤(3)反应完成之后，向所述微流管道内通入对待测菌具有特异性识别性能且5’端由氨基改性过的适配体溶液，以使适配体接枝到所述树状大分子表面。本发明对微流控芯片进行改性，可快速检测食品细菌数量，提高检测效率，并且整个检测环境独立安全，防止交叉污染。
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公开(公告)号：CN107817311A
公开(公告)日：2018-03-20
申请号：CN201710886096.X
申请日：2017-09-27
申请人： 绿城农科检测技术有限公司 , 陈启
IPC分类号： G01N30/88
摘要： 本发明公开了一种液质联用检测配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量的方法，包括以下步骤：(1)在配方奶粉样品中加入质量浓度为10～70％的乙腈水溶液，提取得到配方奶粉中的标记肽，通过液质联用检测标记肽的含量，得到配方奶粉中标记肽含量；(2)采用与步骤(1)相同的方法提取所述配方奶粉样品中所使用的酪蛋白磷酸肽原料中的标记肽，通过液质联用检测标记肽的含量，得到酪蛋白磷酸肽原料中标记肽含量；(3)按照下列公式计算得到所述配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量，配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量＝配方奶粉中标记肽含量/酪蛋白磷酸肽原料中标记肽含量；其中，所述标记肽的序列为VLPVPQK。本发明可用于检测市场上大多数CPP产品。
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公开(公告)号：CN106855543A
公开(公告)日：2017-06-16
申请号：CN201611198414.5
申请日：2016-12-22
申请人： 绿城农科检测技术有限公司
CPC分类号： G01N30/02 , G01N33/6848
摘要： 本发明公开了一种基于化学标记技术的蛋白质同位素稀释串联质谱检测方法，包括以下步骤：(1)采用化学标签A对待测样品进行标记，得到标记样品；(2)采用带同位素标记的化学标签iso‑A对内标物进行标记，得到标记内标物；(3)将所述标记样品与标记内标物按照预设比例混匀，得到初样；(4)对初样进行预处理，得到进样样品；(5)将所述进样样品进行质谱检测。本发明将样品和内标物两种分别标记后，再将两者混合并置于同一反应体系下进行后续的处理工作，使得样品和内标物蛋白质在同一体系中所受到的基质效应、操作误差均相同，使得误差可以得以校正。
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