一种鉴定转基因植物T-DNA插入位点的方法

    公开(公告)号:CN118497391A

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202310701353.3

    申请日:2023-06-14

    Abstract: 本发明提供了一种鉴定转基因植物T‑DNA插入位点的方法,该方法包括:提取基因组DNA;利用Tn5转座酶切割基因组DNA;分别利用四对PCR引物和测序接头引物进行两轮PCR扩增;利用磁珠对第二轮扩增产物进行回收;利用高通量测序对回收产物进行测序,再通过生物信息学分析,确定转基因植物中T‑DNA插入位点。本发明利用转座酶能够切割DNA并在切割后的片段上粘贴接头的特征,对转基因植物的基因组DNA进行切割;结合精心设计的两轮PCR引物,对T‑DNA插入位点进行有效扩增;随后利用二代测序技术对PCR产物进行高通量测序,分析得到T‑DNA在基因组中的插入位置。

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