一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法

    公开(公告)号:CN106399371B

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201610823307.0

    申请日:2016-09-14

    Abstract: 本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV‑LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的,新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶,有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中,经过药物筛选,ES细胞单克隆挑选,Southern Blot或PCR鉴定,发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90%以上,易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠,并且该嵌合体小鼠可以交配传代,从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。

    L-硒代蛋氨酸在动物细胞抗氧化中应用的方法及其产品

    公开(公告)号:CN110724662A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201910728019.0

    申请日:2019-08-08

    Abstract: 本发明提供了L-硒代蛋氨酸在动物细胞抗氧化中应用的方法及其产品,涉及动物细胞培养技术领域。该方法向动物细胞的培养体系中加入L-硒代蛋氨酸工作液,使动物细胞的培养体系中L-硒代蛋氨酸的终浓度为0.5-1.5μM;L-硒代蛋氨酸工作液的浓度为5-15μM。该L-硒代蛋氨酸在动物细胞抗氧化中应用的方法缓解了现有技术缺乏一种有效降低细胞氧化损伤,维持细胞活性,对细胞毒性低,操作简便,成本低的动物细胞抗氧化方法。本发明还提供了包含L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂及包含L-硒代蛋氨酸或L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂的动物细胞培养基,包含L-硒代蛋氨酸或L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂的药品或饲料添加剂。

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