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公开(公告)号:CN106399371B
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201610823307.0
申请日:2016-09-14
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV‑LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的,新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶,有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中,经过药物筛选,ES细胞单克隆挑选,Southern Blot或PCR鉴定,发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90%以上,易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠,并且该嵌合体小鼠可以交配传代,从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。
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公开(公告)号:CN109265521A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201811067175.9
申请日:2018-09-13
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用,PCV2Loop EF区的突变体,其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明,Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装,表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础,同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。
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公开(公告)号:CN110724662A
公开(公告)日:2020-01-24
申请号:CN201910728019.0
申请日:2019-08-08
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N5/071 , A61K31/198 , A61P39/06 , A23K20/142
Abstract: 本发明提供了L-硒代蛋氨酸在动物细胞抗氧化中应用的方法及其产品,涉及动物细胞培养技术领域。该方法向动物细胞的培养体系中加入L-硒代蛋氨酸工作液,使动物细胞的培养体系中L-硒代蛋氨酸的终浓度为0.5-1.5μM;L-硒代蛋氨酸工作液的浓度为5-15μM。该L-硒代蛋氨酸在动物细胞抗氧化中应用的方法缓解了现有技术缺乏一种有效降低细胞氧化损伤,维持细胞活性,对细胞毒性低,操作简便,成本低的动物细胞抗氧化方法。本发明还提供了包含L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂及包含L-硒代蛋氨酸或L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂的动物细胞培养基,包含L-硒代蛋氨酸或L-硒代蛋氨酸的动物细胞抗氧化剂的药品或饲料添加剂。
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公开(公告)号:CN106434750B
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201610850055.0
申请日:2016-09-26
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了靶向打靶载体及靶向整合外源基因至MYH9Intron2位点构建小鼠胚胎干细胞株的方法和应用。所述靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.7所示,命名为mpNTKV‑LoxP MAI2L‑MAI2R载体。本发明提供了一个新的能实现高效、安全、靶向整合的位点序列,基于该位点构建的靶向插入外源基因的打靶载体,不仅可实现高效打靶,而且能够保证外源基因在小鼠胚胎干细胞中稳定表达而内源基因表达不受影响,从而为构建转基因细胞系以及小鼠搭建了一个好的平台。
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公开(公告)号:CN116832039A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310605257.9
申请日:2023-05-26
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院 , 湖南农业大学 , 云南农业大学
IPC: A61K31/5025 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了CHR‑6494在制备防治猪伪狂犬病的药物中的应用,CHR‑6494的结构式如下:#imgabs0#本发明中确定了抑制剂CHR‑6494对PRV增殖具有明显抑制作用。
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公开(公告)号:CN115094060A
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202210727672.7
申请日:2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒,包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物,是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合,建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性,且操作简便,无需昂贵的仪器设备,并具有可视化优势,将该检测方法向猪场及检测单位推广应用,有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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公开(公告)号:CN104498439B
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201410712094.5
申请日:2014-11-28
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20 , B01D15/38 , C12M1/00
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用。本发明通过创造性地采用PCV2病毒样颗粒作为免疫原,由于PCV2病毒样颗粒是更接近于正常PCV2病毒的蛋白组装而成的空壳结构,能够通过和正常病毒感染一样的途径递呈给免疫细胞,诱导免疫系统产生免疫保护反应,使得本发明的杂交瘤细胞分泌得到的单克隆抗体相比PCV2抗原蛋白单克隆抗体具有更高特异性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN106676199A
公开(公告)日:2017-05-17
申请号:CN201710027687.1
申请日:2017-01-16
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2531/125
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬圆环病毒的引物和高效CL‑RCA‑PCR检测试剂盒及方法,所述引物为DogCV‑D‑F:GTGCTTCACCATCAATAATCCTACT和DogCV‑D‑R:AGACTGAGCCGCCGATAGAG;所述试剂盒中包含上述引物。本发明中犬腹泻物样本仅采用DogCV引物PCR方法进行检测。该引物、CL‐RCA‐PCR试剂盒及检测方法的准确性高、特异性强、灵敏性高。
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公开(公告)号:CN106399371A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610823307.0
申请日:2016-09-14
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K2217/05 , A01K2227/105 , A01K2267/03
Abstract: 本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV-LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的,新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶,有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中,经过药物筛选,ES细胞单克隆挑选,Southern Blot或PCR鉴定,发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90%以上,易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠,并且该嵌合体小鼠可以交配传代,从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。
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公开(公告)号:CN115094060B
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202210727672.7
申请日:2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒,包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物,是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合,建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性,且操作简便,无需昂贵的仪器设备,并具有可视化优势,将该检测方法向猪场及检测单位推广应用,有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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