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公开(公告)号：CN119307595A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411393650.7
申请日：2024-10-08
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种LAMP‑CRISPR检测体系及其应用。所述LAMP‑CRISPR检测体系包括LAMP扩增体系和CRISPR检测体系，所述LAMP扩增体系包括特异性扩增PEDV、TGEV、PDCoV和PoRV G9的引物；CRISPR检测体系包括Cas蛋白、crRNA‑F/R和ssDNA探针；所述crRNA‑F/R序列如SEQ ID NO.23‑28、SEQ ID NO.29‑34、SEQ ID NO.35‑40或SEQ ID NO.41‑42所示；ssDNA探针的序列如SEQ ID NO.43‑44所示。本发明通过体系的优化，有效解决了多重检测体系检测的准确度不高的问题。
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公开(公告)号：CN109265521B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201811067175.9
申请日：2018-09-13
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结果表明，Loop EF中第133位氨基酸的突变不影响VLPs组装，表明PCV2VLPs Loop EF区展示外源抗原表位具有可行性。为Loop EF区结构功能研究奠定基础，同时也为展示外源表位构建嵌合型多价疫苗研究提供重要的实验依据。
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公开(公告)号：CN106434750A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610850055.0
申请日：2016-09-26
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12N15/8509 , C12N2800/107 , C12N2800/30
Abstract: 本发明公开了靶向打靶载体及靶向整合外源基因至MYH9Intron2位点构建小鼠胚胎干细胞株的方法和应用。所述靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.7所示，命名为mpNTKV-LoxP MAI2L-MAI2R载体。本发明提供了一个新的能实现高效、安全、靶向整合的位点序列，基于该位点构建的靶向插入外源基因的打靶载体，不仅可实现高效打靶，而且能够保证外源基因在小鼠胚胎干细胞中稳定表达而内源基因表达不受影响，从而为构建转基因细胞系以及小鼠搭建了一个好的平台。
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公开(公告)号：CN115094060A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210727672.7
申请日：2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒，包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物，是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合，建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性，且操作简便，无需昂贵的仪器设备，并具有可视化优势，将该检测方法向猪场及检测单位推广应用，有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN104498439B
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201410712094.5
申请日：2014-11-28
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20 , B01D15/38 , C12M1/00
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞、PCV2单克隆抗体及其应用。本发明通过创造性地采用PCV2病毒样颗粒作为免疫原，由于PCV2病毒样颗粒是更接近于正常PCV2病毒的蛋白组装而成的空壳结构，能够通过和正常病毒感染一样的途径递呈给免疫细胞，诱导免疫系统产生免疫保护反应，使得本发明的杂交瘤细胞分泌得到的单克隆抗体相比PCV2抗原蛋白单克隆抗体具有更高特异性和灵敏度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106399371A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610823307.0
申请日：2016-09-14
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K2217/05 , A01K2227/105 , A01K2267/03
Abstract: 本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV-LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的，新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶，有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中，经过药物筛选，ES细胞单克隆挑选，Southern Blot或PCR鉴定，发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90％以上，易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠，并且该嵌合体小鼠可以交配传代，从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。
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公开(公告)号：CN119569890A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202311137200.7
申请日：2023-09-05
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C07K19/00 , C07K14/315 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , B82Y5/00 , B82Y40/00
Abstract: 本发明提供了一种基于非洲猪瘟病毒的C type lectin蛋白纳米颗粒、融合蛋白、及制备和应用；本发明基于插入了Spytag标签的Ferritin纳米颗粒作为外源抗原展示载体，与非洲猪瘟病毒C type lectin胞外域和Spycatcher融合后获得的重组蛋白进行共价连接，并通过凝胶层析等手段对连接后的纳米颗粒成功进行纯化。在动物免疫评价实验中，发现C type lectin胞外域与Ferritin纳米颗粒连接后，机体内C type lectin特异性抗体的水平明显获得提高，且有利于增加机体T细胞免疫反应。
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公开(公告)号：CN115094060B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202210727672.7
申请日：2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒，包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物，是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合，建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性，且操作简便，无需昂贵的仪器设备，并具有可视化优势，将该检测方法向猪场及检测单位推广应用，有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN114214458A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111560511.5
申请日：2021-12-17
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种同时检测四种猪繁殖障碍病原的多重荧光定量PCR引物和探针及其方法，包括针对猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒的四个基因PCV2‑cap、PCV3‑cap、PPV‑NS1和PRV‑gE的保守片段的引物和探针。本发明检测方法具有较高的特异性和敏感性，可较好地适配于多通道荧光PCR仪，能有效应用于四种猪繁殖障碍相关病原的检测与分析，能在较短的时间内完成疾病的诊断检测，以为科学合理地制定防控措施提供有效工具。
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公开(公告)号：CN110669142A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910942130.X
申请日：2019-09-30
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，是通过对PCV2 Cap蛋白进行了RGD多肽序列短肽修饰，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上，并在体外组装成表面融合RGD的PCV2病毒样颗粒。与野生型PCV2病毒样颗粒相比，融合RGD的PCV2病毒样颗粒免疫小鼠产生的PCV2特异性IgM和IgG抗体水平显著升高，能诱导产生高滴度的PCV2抗体，融合RGD的PCV2病毒样颗粒增强体液免疫应答。融合RGD的PCV2病毒样颗粒可应用于增强型VLPs和鉴别诊断的分子标签VLPs疫苗研制，为PCV2疫苗的研发提供了新思路。
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