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公开(公告)号：CN117384935A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202210807627.2
申请日：2022-07-11
Applicant: 东莞深圳清华大学研究院创新中心 , 清华大学
Abstract: 本发明公开一种适用于谷氨酸棒杆菌的重组表达载体pEC‑Cg1554‑CALB，所述重组表达载体中外源蛋白基因包括启动子和信号肽；所述启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述信号肽的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；还公开一种表达重组脂肪酶的谷氨酸棒杆菌和构建方法；以及公开一种表达重组脂肪酶的谷氨酸棒杆菌在发酵生产重组脂肪酶、催化合成生物柴油中的应用。本发明通过利用基因工程技术构建重组的谷氨酸棒杆菌，使其能够在发酵液中直接分泌脂肪酶，与现有的其他方法相比，发酵周期短，生产过程简单，达到食品安全等级，具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN105400831B
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201510890661.0
申请日：2015-12-07
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
Abstract: 本发明公开了一种利用重组谷氨酸棒杆菌发酵联产1，3‑丙二醇和谷氨酸的方法，包括通过以下步骤获得重组谷氨酸棒杆菌：1)在谷氨酸棒杆菌中引入1，3‑丙二醇脱氢酶的编码基因；2)在谷氨酸棒杆菌中引入1，2‑丙二醇脱水酶及其激活因子的编码基因或者引入甘油脱水酶及其激活因子的编码基因。本发明所提供的方法采用了谷氨酸棒杆菌为生产菌株，解决了生物安全性的问题，降低了菌体处理的成本。本发明所提供的方法充分耦联谷氨酸和1，3‑丙二醇生产过程，使得还原力得到充分利用。在不降低谷氨酸得率的同时，获得极高的1，3‑丙二醇对甘油的质量转化率，而且反应的副产物少，分离过程简便。
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公开(公告)号：CN105950642A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610576214.2
申请日：2016-07-20
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
CPC classification number: C12N9/88 , C12P7/18 , C12P7/42 , C12Y402/0103
Abstract: 本发明提供了一种对氧及甘油具有耐受性的甘油脱水酶基因及其应用，本发明的甘油脱水酶基因dhaB1B2来自百脉根根瘤菌，仅包括两个亚基，大的α亚基和小的β亚基，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示。本发明的甘油脱水酶基因dhaB1B2具有很高的催化活性，且甘油及氧对其酶活的抑制作用远远低于目前已知的其他B12‑依赖型甘油脱水酶。另外，本发明的甘油脱水酶基因可以显著提高1,3‑丙二醇和3‑羟基丙酸的产量，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN105950529A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610474970.4
申请日：2016-06-24
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
Abstract: 本发明涉及产3‑羟基丙酸的重组谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用，所述重组谷氨酸棒杆菌是通过在谷氨酸棒状杆菌中过表达内源的磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶基因hdpA，并过表达甘油脱氢酶基因gldA、甘油脱水酶及其激活因子基因pduCDEGH及3‑羟基丙醛脱氢酶基因aldH构建得到的。利用该重组菌发酵生产3‑羟基丙酸，由于谷氨酸棒杆菌能够利用不同的廉价原料进行发酵，因此可进一步降低原料的成本。本发明解决了生物安全性以及菌株对酸的耐受性问题。同时发酵过程中的菌体可作为产品，用于饲料添加剂中。本方法副产物少，使终产物3‑羟基丙酸的分离过程得到简化。
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公开(公告)号：CN105950529B
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201610474970.4
申请日：2016-06-24
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
Abstract: 本发明涉及产3‑羟基丙酸的重组谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用，所述重组谷氨酸棒杆菌是通过在谷氨酸棒状杆菌中过表达内源的磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶基因hdpA，并过表达甘油脱氢酶基因gldA、甘油脱水酶及其激活因子基因pduCDEGH及3‑羟基丙醛脱氢酶基因aldH构建得到的。利用该重组菌发酵生产3‑羟基丙酸，由于谷氨酸棒杆菌能够利用不同的廉价原料进行发酵，因此可进一步降低原料的成本。本发明解决了生物安全性以及菌株对酸的耐受性问题。同时发酵过程中的菌体可作为产品，用于饲料添加剂中。本方法副产物少，使终产物3‑羟基丙酸的分离过程得到简化。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105400831A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510890661.0
申请日：2015-12-07
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
Abstract: 本发明公开了一种利用重组谷氨酸棒杆菌发酵联产1，3-丙二醇和谷氨酸的方法，包括通过以下步骤获得重组谷氨酸棒杆菌：1)在谷氨酸棒杆菌中引入1，3-丙二醇脱氢酶的编码基因；2)在谷氨酸棒杆菌中引入1，2-丙二醇脱水酶及其激活因子的编码基因或者引入甘油脱水酶及其激活因子的编码基因。本发明所提供的方法采用了谷氨酸棒杆菌为生产菌株，解决了生物安全性的问题，降低了菌体处理的成本。本发明所提供的方法充分耦联谷氨酸和1，3-丙二醇生产过程，使得还原力得到充分利用。在不降低谷氨酸得率的同时，获得极高的1，3-丙二醇对甘油的质量转化率，而且反应的副产物少，分离过程简便。
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公开(公告)号：CN105441372A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201510729258.X
申请日：2015-10-30
Applicant: 清华大学 , 东莞深圳清华大学研究院创新中心
Abstract: 本发明涉及重组微生物，具体公开了一种可将发酵糖直接转化为乙二醇的重组谷氨酸棒杆菌与应用。本发明通过在谷氨酸棒杆菌的基础上引入外源基因，并上调了丝氨酸合成基因，敲除了丝氨酸降解基因，得到重组谷氨酸棒杆菌。使其在具有丝氨酸高含量的基础上，通过表达外源基因，独立的完成丝氨酸-乙二醇的代谢途径。即，所述重组谷氨酸棒杆菌能够以发酵糖为碳源，直接生产乙二醇，而不需要借助其他外源酶，弥补了现有技术中的不足，为建立生物法乙二醇的工业化生产奠定基础。经本发明提供的重组谷氨酸棒杆菌发酵生产的乙二醇，实际转化率达10％以上。
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公开(公告)号：CN117736950A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311464135.9
申请日：2023-11-06
Applicant: 清华大学 , 北京绿色康成生物技术有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12P7/42 , C12P7/18 , C12P7/46 , C12P7/56 , C12R1/15
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，具体公开了生产4‑羟基丁酸或1,4‑丁二醇的重组微生物及其构建方法与应用。本发明的重组微生物，与出发菌株相比，具有降低的gabD基因表达量，或具有降低的gabD基因和ldh基因表达量，或具有降低的gabD基因、ldh基因和ald基因表达量；所述出发菌株为可合成4‑羟基丁酸或1,4‑丁二醇的谷氨酸棒杆菌。本发明的重组微生物可降低副产物的积累，显著提高4‑羟基丁酸或1,4‑丁二醇的产量和生产效率。
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公开(公告)号：CN114107144B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202111301013.9
申请日：2021-11-04
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明涉及基因工程和生物发酵技术领域，具体公开了一种副产物少、高产1,3‑丙二醇的重组微生物及其应用。本发明提供了一种重组微生物，所述重组微生物与出发菌株相比，具有降低的乙醇脱氢酶adhA和/或乙醛脱氢酶ald的表达和/或酶活性；所述出发菌株为可合成1,3‑丙二醇的谷氨酸棒杆菌。所述表达和/或酶活性的降低可通过敲除或下调如下基因中的一个或多个实现：1)乙醇脱氢酶adhA基因；2)乙醛脱氢酶ald基因；3)adhA和ald的调控蛋白基因ramA。应用本发明的重组微生物生产1,3‑丙二醇时，生物安全度高、副产物少、产量高、操作简便且成本低廉。
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公开(公告)号：CN116286498A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310135559.4
申请日：2023-02-20
Applicant: 湖南省核农学与航天育种研究所 , 清华大学 , 古巴甘蔗衍生品研究所 , 湖南省农业科学院
Inventor： 刘安 , 王克勤 , 刘德华 , 尤拉利亚•戈麦斯•桑提斯特班 , 谭新球 , 陈亮 , 武小芬 , 齐慧 , 张祺玲 , 王振 , 邓明 , 陈振 , 伊芙琳•法夫•佩雷斯 , 张鑫 , 安娜•内利斯•圣胡安•罗德里格斯 , 内拉•奥乔亚•维纳尔斯
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及贝莱斯芽孢杆菌及其用途。贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis BAC81712)菌株，所述菌株的保藏编号为CCTCC NO:M 2022954。本发明的菌株或其发酵液能有效抑制水稻稻瘟病菌和炭疽病菌，且遗传稳定性高。
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