公开(公告)号：CN118226018A

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202211635692.8

申请日：2022-12-19

申请人： 深圳大学

发明人： 王宇 ,  张菊

IPC分类号： G01N33/53 ,  A61K31/7088 ,  A61K47/60 ,  A61P31/14 ,  G01N33/68 ,  C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  G01N33/569

摘要： 本发明提供了一种基于CRISPR/Cas技术针对靶蛋白筛选RNA核酸适配体的系统，其中所述系统包含：（i）向导RNA，其含有识别序列和预定长度的核酸适配体随机文库；（ii）靶向序列，其与所述向导RNA的识别序列配对；（iii）选择标记，其位于所述靶向序列下游，包括基本启动子和选择标记基因；（iv）融合蛋白，其包含所述靶蛋白和转录激活元件，所述靶蛋白与所述核酸适配体随机文库中的RNA核酸适配体结合导致所述转录激活元件与所述选择标记的结合；（v）dCas蛋白，其在所述向导RNA引导下特异性识别靶向序列，以及（vi）筛选细胞。本发明还提供了利用上述系统筛选针对靶蛋白的RNA核酸适配体的方法，以及针对SARS‑CoV‑2病毒的S1蛋白筛选到的RNA核酸适配体及其应用。

公开(公告)号：CN118792282A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202310442678.4

申请日：2023-04-13

申请人： 深圳大学

发明人： 王宇 ,  陈丽 ,  黄成思

IPC分类号： C12N9/22 ,  C07K19/00 ,  C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10

摘要： 本发明涉及基因编辑领域，特别是基于CRISPR/Cas技术的基因编辑领域。具体而言，本发明涉及一种Un1Cas12f1突变体，其氨基酸序列相对于野生型Un1Cas12f1的氨基酸序列包含M427F和F487W取代中的一个或两个，其中氨基酸残基按照如SEQ ID NO:1所示的野生型Un1Cas12f1的氨基酸序列编号。本发明还涉及包含所述Un1Cas12f1突变体的氨基酸序列且进一步包含D143R、T147R、G297C、D326A、K330R、D510A和E528R取代的dUn1Cas12f1蛋白或不包含G297位置的突变的dUn1Cas12f1蛋白；编码所述Un1Cas12f1突变体、所述dUn1Cas12f1蛋白或nUn1Cas12f1蛋白的多核苷酸；包含所述Un1Cas12f1突变体、所述dUn1Cas12f1蛋白或nUn1Cas12f1蛋白的融合蛋白，CRISPR/Cas核酸酶系统，CRISPR/Cas延伸系统，载体，细胞和试剂盒；以及所述Un1Cas12f1突变体、所述dUn1Cas12f1蛋白或nUn1Cas12f1蛋白的应用。