公开(公告)号：CN109536594B

公开(公告)日：2022-11-01

申请号：CN201710855713.X

申请日：2017-09-20

申请人： 深圳华大智造科技股份有限公司

发明人： 李计广 ,  马可心 ,  赵芳 ,  邱敏 ,  韦小芳 ,  冯太青 ,  龙小娟 ,  齐晓娟 ,  王静静 ,  刘二凯 ,  陈奥 ,  徐崇钧 ,  章文蔚

IPC分类号： C12Q1/6869

摘要： 本申请公开了一种用于Small RNA的测序方法、测序试剂和应用。本申请用于Small RNA的测序方法，包括在对混合样本的环状文库进行测序时，向引物溶液中添加正常测序引物和阻断测序引物，采用混合引物进行测序；阻断测序引物由正常测序引物3’末端羟基经化学修饰而成。本申请的测序方法，通过添加阻断测序引物，使得混合样本环状文库Small RNA测序得以实现，并能有效的保障标签序列的测序，进而提高了数据利用率，得到良好的拆分率。本申请的Small RNA测序方法和测序试剂，为Small RNA混合样本测序提供了一种新的思路和方案，解决了目前的环状文库Small RNA测序的测序资源浪费等问题。

公开(公告)号：CN115927566A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202211321287.9

申请日：2017-09-20

申请人： 深圳华大智造科技股份有限公司

发明人： 李计广 ,  马可心 ,  赵芳 ,  邱敏 ,  韦小芳 ,  冯太青 ,  龙小娟 ,  齐晓娟 ,  王静静 ,  刘二凯 ,  陈奥 ,  徐崇钧 ,  章文蔚

IPC分类号： C12Q1/6869

摘要： 本申请公开了一种用于Small RNA的测序方法、测序试剂和应用。本申请用于Small RNA的测序方法，包括在对混合样本的环状文库进行测序时，向引物溶液中添加正常测序引物和阻断测序引物，采用混合引物进行测序；阻断测序引物由正常测序引物3’末端羟基经化学修饰而成。本申请的测序方法，通过添加阻断测序引物，使得混合样本环状文库Small RNA测序得以实现，并能有效的保障标签序列的测序，进而提高了数据利用率，得到良好的拆分率。本申请的Small RNA测序方法和测序试剂，为Small RNA混合样本测序提供了一种新的思路和方案，解决了目前的环状文库Small RNA测序的测序资源浪费等问题。

公开(公告)号：CN109722471B

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN201711027564.4

申请日：2017-10-27

申请人： 深圳华大智造科技股份有限公司

发明人： 邱敏 ,  李计广 ,  王静静 ,  刘二凯 ,  黎宇翔 ,  冯太青 ,  马可心 ,  赵芳 ,  齐晓娟 ,  龙小娟 ,  韦小芳 ,  陈奥 ,  章文蔚 ,  徐崇钧

IPC分类号： C12Q1/686 ,  C40B50/06

摘要： 一种改善文库滚环复制效率均一性的方法、文库构建方法及试剂盒，所述改善文库滚环复制效率均一性的方法包括：在文库构建的PCR扩增过程中，引入至少一种修饰的PCR引物，所述修饰的PCR引物在至少一个核苷酸位点上具有至少一个用于减缓滚环复制反应速度的修饰基团。本发明中的修饰基团不会影响PCR扩增的效率，但是在滚环复制过程中，在同一个体系内，能够同时降低大小片段的滚环复制效率，从而达到相同的时间内，两种片段实现相同或相近的拷贝数扩增，从而达到两种片段的信号值均一性相同。

公开(公告)号：CN114846153A

公开(公告)日：2022-08-02

申请号：CN202080087320.9

申请日：2020-01-17

申请人： 深圳华大智造科技股份有限公司

发明人： 龚梅花 ,  刘生茂 ,  徐崇钧 ,  周爽 ,  王静静 ,  李计广 ,  韦小芳 ,  蒋慧 ,  刘健

IPC分类号： C12Q1/6869

摘要： 一种同步进行DNA正义链和反义链测序的方法，包括：以待测序的环状DNA分子为模板进行第一轮滚环扩增生成第一部分模板链；在第一部分模板链上杂交上阻断或未阻断的扩增引物，然后继续以环状DNA分子为扩增模板进行第二轮滚环扩增生成第二部分模板链；以第一部分模板链和第二部分模板链中的任一部分模板链作为一链测序模板，以另一部分模板链为扩增模板进行多重置换扩增生成二链测序模板；分别在一链测序模板和二链测序模板上杂交上一链测序引物和二链测序引物，同时进行一链测序和二链测序，得到DNA正义链和反义链的序列。本发明的方法可实现同时从DNA的两端进行测序，从而大大节省测序时间和测序成本，提高测序通量。