-
公开(公告)号：CN118834853A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202410827744.4
申请日：2024-06-25
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P13/04 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了一种I‑E型CRISPRi系统及在构建高产D‑泛酸工程菌中的应用，本发明将Cas相关蛋白基因序列通过UTR12序列串联成为多顺反子结构以在翻译水平上提高蛋白的表达，通过替换表达Cascade效应物的启动子P43为木糖诱导型启动子PxylA，获得可控的I‑E型CRISPRi，通过不同诱导剂木糖浓度的添加实现抑制能力的控制。本发明在增强菌株D‑泛酸合成能力的基础上，运用I‑E型CRISPRi系统平衡菌株生长与D‑泛酸的生产，使得在无前体添加时D‑泛酸产量相较出发菌从检测限以下提高到12.8g/L。该系统具有更小的细胞毒性与更广泛的PAM位点选择。
-
公开(公告)号：CN118308396A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410609887.8
申请日：2024-05-16
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明提供了一种用于遗传转化的重组多粘类芽孢杆菌的构建方法，以及通过该方法构建得到的重组多粘类芽孢杆菌。本发明通过敲除组成多粘类芽孢杆菌Ⅰ型限制系统限制性核酸内切酶的R亚基的相应基因PpoAIP，验证基因缺失株的限制酶功能，并通过回补实验进一步证明了内切酶的R亚基是I型限制修饰系统中限制性核酸内切酶具有切割DNA功能的亚基。最终确定了一种遗传操作系统的可行性，即所述的基因PpoAIP缺失的重组多粘类芽孢杆菌，为后续在多粘类芽孢杆菌中开发细菌工厂奠定了基础。同时，基于所述重组多粘类芽孢杆菌的遗传操作系统具有效率高、操作简单的优点，可供其他多粘类芽孢杆菌进行系统研究。
-
公开(公告)号：CN116987652A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310824877.1
申请日：2023-07-06
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/75 , C12P13/02 , C12R1/125
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种生产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及应用。本发明通过强化D‑泛酸合成途径上泛酸合成酶基因panC的表达、强化泛解酸合成途径中3‑甲基‑2‑羟甲基转移酶基因panB的表达以及酮泛解酸还原酶基因panE的表达、强化α‑酮异戊酸合成途径上包括乙酰乳酸合成酶基因alsS、二羟酸脱水酶基因ilvD的表达；并敲除苏氨酸脱水酶基因ilvA以弱化支链氨基酸合成，得到高产D‑泛酸的枯草芽孢杆菌基因工程菌，该工程菌DPA产量的最大产量可达到22g/L。
-
公开(公告)号：CN116463274A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310290532.2
申请日：2023-03-23
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/67 , C12N15/31 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12P13/02 , A23K10/18 , A23K50/80 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了一种高产D‑泛酸的益生工程菌及其在产D‑泛酸和制备益生菌添加剂中的应用，所述益生工程菌以枯草芽孢杆菌ATCC 23857为底盘菌，将其基因组中panBCD基因簇、alsS基因、ilvD基因、panE2基因、aspB基因的启动子分别替换为P43启动子，panBCD基因前UTR序列替换为UTRm，敲除pdhA基因或spo0A基因中的一种，同时敲除ilvA基因和aspA基因，构建获得的；本发明益生工程菌减少D‑泛酸合成过程中对底物β‑丙氨酸的需求，实现无前体添加的D‑泛酸合成。本发明构建的益生工程菌还可应用于饲料中，达到促进动物生长发育的效果，例如斑马鱼的体重增长。
-
-
-
搜索结果
4 条记录 (耗时 0.025 秒)
