一种检测蛹虫草中虫草素含量的方法

    公开(公告)号:CN113155999A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110338243.6

    申请日:2021-03-30

    Abstract: 本发明涉及一种检测蛹虫草中虫草素含量的方法,包括(1)收集蛹虫草的菌丝体和发酵上清液,制备待测品;将待测品1、2以及配好的虫草素标准品溶液,在相同色谱条件下分别进行高效液相色谱检测,根据检测结果计算出所述待测样品1、2的虫草素含量。检测结果表明,虫草素在0.02‑0.1mg/mL范围内具有良好的线性关系,回归方程为Y=27692919.69X‑135695.5252(R2=0.999728197);待测样品1虫草素的含量为70.39mg/L,待测样品2虫草素的含量为1080.20mg/L。该方法具有分析速度快、灵敏度高、选择性化、操作方便等优点。

    一种多基因组合表达制备蛹虫草多糖的方法

    公开(公告)号:CN111518825A

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN202010360842.3

    申请日:2020-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种多基因组合表达制备蛹虫草多糖的方法,所述方法是将组合基因导入蛹虫草细胞构建重组蛹虫草基因工程菌,再将重组蛹虫草基因工程菌接种在发酵培养基中,在22~25℃,100‑150rpm条件下发酵培养,获得含蛹虫草多糖的发酵液,将发酵液分离纯化,获得蛹虫草多糖;所述组合基因是指磷酸葡萄糖变位酶基因pgm,焦磷酸化酶基因ugp或UDP‑葡萄糖‑6‑脱氢酶基因ugdh中任意两种的组合。本发明通过基因组合表达技术构建得到了重组蛹虫草基因工程菌,该基因工程菌株与野生型菌株相比,其发酵液中的虫草胞外多糖产量为1.78倍,并且高于目前文献报道的发酵产生的最大虫草胞外多糖产量5.713g/L。

    一种提高蛹虫草中虫草多糖含量的方法

    公开(公告)号:CN111454999B

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN202010127415.0

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种提高蛹虫草中虫草多糖含量的方法,所述方法为:将含目的基因的蛹虫草重组菌接种至发酵培养基中,22~25℃,120~180rpm,摇床培养,获得含虫草多糖的发酵液;所述目的基因为葡萄糖激酶基因gk、磷酸葡萄糖变位酶基因pgm或焦磷酸化酶基因ugp。本发明通过转基因技术获得了蛹虫草的基因突变菌株,该突变菌株与原始型菌株相比,其发酵液中虫草多糖的产量为1.35倍,为进一步筛选蛹虫草的优良品种打下了基础。

    一种提高蛹虫草虫草素含量的液体发酵培养基

    公开(公告)号:CN113151007A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110338246.X

    申请日:2021-03-30

    Abstract: 本发明提供一种提高蛹虫草中虫草素含量的液体发酵培养基,所述的提高蛹虫草中虫草素含量的液体发酵培养基包括以下终浓度的各组分:可溶性淀粉20‑40g/L,蛋白胨10‑30g/L,KH2PO4 0.5‑1.5g/L,MgSO4·7H2O 0.5‑1.5g/L,L‑甘氨酸1.0‑5.0g/L,溶剂为蒸馏水,PH自然。本发明提供的培养基培育蛹虫草菌株,使得虫草素的生产效率提高了,且生产设备简单,生产条件易于控制,生产周期短,生产成本低,对提高虫草素产量的进一步研究和开发利用具有重要意义。

    一种利用过表达己糖激酶基因HK提高蛹虫草胞外多糖产量的方法

    公开(公告)号:CN114426995A

    公开(公告)日:2022-05-03

    申请号:CN202210090690.9

    申请日:2022-01-26

    Abstract: 本发明公开了一种利用过表达己糖激酶基因HK提高蛹虫草胞外多糖产量的方法,所述方法是将含己糖激酶基因HK的蛹虫草基因工程菌接种至发酵培养基,22~25℃,120~180rpm摇床发酵培养,获得含蛹虫草胞外多糖的发酵液,将发酵液进行分离纯化得到蛹虫草胞外多糖。本发明通过基因工程技术过表达构建得到稳定遗传的重组蛹虫草基因工程菌,该基因工程菌株与野生型菌株相比,其发酵液中的蛹虫草胞外多糖产量为1.61倍,而同样过表达甘露糖‑1‑磷酸尿苷转移酶基因MPG的突变菌株与野生型菌株相比,其发酵液中胞外多糖的产量为0.91倍,为进一步筛选蛹虫草的优良品种打下基础。

    一种提高蛹虫草中虫草多糖含量的方法

    公开(公告)号:CN111454999A

    公开(公告)日:2020-07-28

    申请号:CN202010127415.0

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种提高蛹虫草中虫草多糖含量的方法,所述方法为:将含目的基因的蛹虫草重组菌接种至发酵培养基中,22~25℃,120~180rpm,摇床培养,获得含虫草多糖的发酵液;所述目的基因为葡萄糖激酶基因gk、磷酸葡萄糖变位酶基因pgm或焦磷酸化酶基因ugp。本发明通过转基因技术获得了蛹虫草的基因突变菌株,该突变菌株与原始型菌株相比,其发酵液中虫草多糖的产量为1.35倍,为进一步筛选蛹虫草的优良品种打下了基础。

    利用柑橘皮制备木糖醇的方法

    公开(公告)号:CN111440829A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN202010123615.9

    申请日:2020-02-27

    Abstract: 一种利用柑橘皮制备木糖醇的方法,所述方法按如下步骤进行:(1)水解;(2)中和;(3)脱色;(4)离子交换;(5)发酵。以柑橘皮为原料,采用生物转化法生产木糖醇,可省去多次提纯、精制步骤,提高木糖利用率和木糖醇转化率,实现木糖醇低成本的关键技术突破。本发明提供一种原材料新颖、反应条件温和、成本低、绿色生产、环境友好,易于实现工业化的木糖醇的制备方法。

    一种农杆菌介导外源基因导入蛹虫草细胞的方法

    公开(公告)号:CN111349648A

    公开(公告)日:2020-06-30

    申请号:CN202010127483.7

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导外源基因导入蛹虫草细胞的方法,所述方法至少包括以下步骤:将无菌纤维素薄膜贴合在共培养固体培养基表面,然后将蛹虫草孢子悬液与含外源基因的农杆菌菌液等体积混合,涂布于无菌纤维素薄膜上,24℃恒温避光共培养48h后,将混合菌液连同纤维素薄膜转移至选择培养基,在贴合紧密的纤维素薄膜表面倒上一层选择培养基,22~25℃恒温避光培养;取穿透上层选择培养基的菌丝转接至传代培养基中,22~25℃恒温避光培养3~4d,筛选获得含外源基因的蛹虫草;本发明采蛹虫草外源基因遗传转化效率高达100%,成本低,操作简易。

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