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公开(公告)号:CN112375807B
公开(公告)日:2023-02-21
申请号:CN202011289430.1
申请日:2017-12-30
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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公开(公告)号:CN111073952A
公开(公告)日:2020-04-28
申请号:CN201910202577.3
申请日:2019-07-15
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806 , C40B50/06
摘要: 本发明公开了构建DNA文库的方法及其应用。其中,该方法包括将DNA样本进行末端修复后,利用耐高温聚合酶对DNA样本进行加腺苷酸尾处理,以便得到加尾后的DNA,其中,所述末端修复和所述加腺苷酸尾处理是连续进行的;以及将所述加尾后的DNA进行接头连接处理,以便得到连接产物,DNA文库其中,所述末端修复和加腺苷酸尾处理的条件是:27-37摄氏度,5-30分钟;70-75摄氏度,10-20分钟。该方法末端修复和加腺苷酸尾处理连续进行,中间无需纯化处理,稳定性好,同时还显著缩短了反应时间和反应流程。
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公开(公告)号:CN111073952B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN201910202577.3
申请日:2019-07-15
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806 , C40B50/06
摘要: 本发明公开了构建DNA文库的方法及其应用。其中,该方法包括将DNA样本进行末端修复后,利用耐高温聚合酶对DNA样本进行加腺苷酸尾处理,以便得到加尾后的DNA,其中,所述末端修复和所述加腺苷酸尾处理是连续进行的;以及将所述加尾后的DNA进行接头连接处理,以便得到连接产物,DNA文库其中,所述末端修复和加腺苷酸尾处理的条件是:27‑37摄氏度,5‑30分钟;70‑75摄氏度,10‑20分钟。该方法末端修复和加腺苷酸尾处理连续进行,中间无需纯化处理,稳定性好,同时还显著缩短了反应时间和反应流程。
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公开(公告)号:CN111100905B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN201911354966.4
申请日:2019-12-25
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明公开了缓冲液及其应用,其中,该缓冲液包括:33‑66mM Tris缓冲液,1.6‑5mM二价阳离子、25‑75mM一价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。该缓冲液能提高连接反应效率,增加底物的转化率,降低连接反应的错配率,并且兼容性好,对连接酶的抑制作用小,同时,显著降低体系用酶量,从而降低了实验的成本。
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公开(公告)号:CN113026114B
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN201911353781.1
申请日:2019-12-25
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液及其应用,其中,该缓冲液包括:5‑25mM Tris缓冲液、5‑20mM二价阳离子、75‑150mM一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mM二硫苏糖醇,pH8‑10。该缓冲液的兼容性好,稳定性高,适用于文库构建过程中的多步反应,使文库构建过程中的多步反应可以连续进行,无需纯化,显著降低了反应时间,并且,有利于提高构建DNA文库的方法的效率和稳定性,同时,对T4DNA连接酶无明显的抑制作用。
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公开(公告)号:CN113026113A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201911353778.X
申请日:2019-12-25
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。
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公开(公告)号:CN109988817B
公开(公告)日:2020-12-04
申请号:CN201711486034.6
申请日:2017-12-30
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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公开(公告)号:CN111100905A
公开(公告)日:2020-05-05
申请号:CN201911354966.4
申请日:2019-12-25
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明公开了缓冲液及其应用,其中,该缓冲液包括:33-66mM Tris缓冲液,1.6-5mM二价阳离子、25-75mM一价阳离子、0.5-10mM二硫苏糖醇(DTT)、5-15%PEG4000-8000和0.5-2mM ATP,pH值为7-9。该缓冲液能提高连接反应效率,增加底物的转化率,降低连接反应的错配率,并且兼容性好,对连接酶的抑制作用小,同时,显著降低体系用酶量,从而降低了实验的成本。
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公开(公告)号:CN111321201A
公开(公告)日:2020-06-23
申请号:CN201911373203.4
申请日:2019-12-27
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12Q1/6869
摘要: 本发明公开了制备用于测序的核酸的方法及其应用,其中,制备用于测序的核酸的方法包括:提供第一序列,所述第一序列包含靶序列和第一重组酶识别序列;提供第二序列,所述第二序列包括:中间段:所述中间段形成至少一个双链体区域,且含有第二重酶识别序列,且所述第一重组酶识别序列与所述第二重酶识别序列具有至少一个相同的酶切序列;两个接头段:所述两个接头段分别位于所述中间段的端部,且每个所述接头段含有至少一个单链体区域,且其中一个接头段含有至少一个引物结合位点;以及将所述第一序列和所述第二序列接触,进行重组反应,以便获得所述用于测序的核酸,所述用于测序的核酸含有所述靶序列。
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公开(公告)号:CN109988817A
公开(公告)日:2019-07-09
申请号:CN201711486034.6
申请日:2017-12-30
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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