-
公开(公告)号:CN120064661A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510177499.1
申请日:2025-02-18
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/68 , C12N15/82 , C12N15/62 , C12N15/65 , A01H5/00 , A01H6/46 , A01H5/10 , C12N9/00 , C12N9/10 , C07K1/14 , C12N15/54 , G01N27/62 , G01N1/34 , G01N1/40
Abstract: 本发明公开了一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法,属于生物技术领域。所述方法包括:首先将目的蛋白与TurboID生物素连接酶形成融合蛋白,构建稳定表达融合蛋白的转基因水稻植株;再将转基因植株开花后7‑9天的发育种子与浓度为100‑400μM的生物素溶液混合,抽真空处理10‑30 min后放置8‑36 h;然后取生物素处理后的水稻胚乳样品进行蛋白提取、富集、质谱鉴定水稻胚乳内生物素标记的互作蛋白。本发明提供了一种基于TurboID系统在水稻胚乳内对目的蛋白质进行了临近空间标记的方法,利用该方法可以用于解析其可能存在的蛋白质‑蛋白质相互作用。