基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法

    公开(公告)号:CN105255944B

    公开(公告)日:2018-10-19

    申请号:CN201510773582.1

    申请日:2015-11-13

    IPC分类号: C12N15/861 C12N5/10

    摘要: 本发明公开了一种基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法,即通过腺病毒载体转大鼠OPN基因从而达到体外促进大鼠原代肝细胞增殖的方法,包括步骤:(1)大鼠OPN基因的获得;(2)重组腺病毒载体的构建;(3)腺病毒的包装与扩增;(4)大鼠原代肝细胞的分离与培养;(5)腺病毒对大鼠原代肝细胞的体外侵染。本发明提供的方法成本低廉,操作简单,并且能够达到很好的促肝细胞体外增殖的效果。

    一种大鼠原代肝细胞的优化培养方法

    公开(公告)号:CN105505883A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201610038988.X

    申请日:2016-01-12

    IPC分类号: C12N5/10 C12N5/071

    CPC分类号: C12N5/067

    摘要: 本发明公开了一种大鼠原代肝细胞的优化培养方法,包括如下步骤:将大鼠原代肝细胞上样于微孔培养板,离心后置于肝细胞无血清培养液培养;培养完成后,收集原代肝细胞,并转染成改造细胞置于肝细胞无血清培养基进行微载体悬浮培养;所述肝细胞无血清培养液包括基础培养基、胰岛素、亚硒酸钠、表皮生长因子、肝细胞生长因子、纤粘连蛋白、地塞米松和奶蓟草提取物;所述肝细胞无血清培养基包括高糖培养基、表皮再生丝素蛋白纤维、地塞米松、葛仙米提取物等。本发明利用力学紧凑种植原代肝细胞,可以使肝细胞间排列紧凑,形成紧密接触,肝细胞可以快速形成高密度培养;采用无血清培养基配方,使其更适合肝细胞的生长及功能发挥,从而实现了体外肝细胞的大量培养。

    一种肝脏细胞的miR-183调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用

    公开(公告)号:CN109394779B

    公开(公告)日:2021-11-02

    申请号:CN201811209764.6

    申请日:2018-10-17

    摘要: 本发明涉及一种调节肝脏细胞的miR‑183调节物在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用,调节物包括抑制Tnfrsf1α表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物;调节肝脏细胞药物为含有所述调节物的药物以使所述调节物能够发挥作用。调节物包括能够促进肝脏细胞增殖的miR‑183模拟物。调节物还包括能够促进肝脏细胞凋亡的抑制物。本发明提供了一种能够调节肝脏细胞的调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞增殖药物中的应用,本申请人通过研究发现了能够调节肝脏细胞增殖或凋亡的调节物,即miR‑183模拟物和抑制物,二者分别具有显著的促进肝细胞增殖和抑制肝细胞增殖的作用,故可制成相应的药物,来实现对肝细胞的调节。

    一种肝脏细胞的miR-429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用

    公开(公告)号:CN109646449A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201811209040.1

    申请日:2018-10-17

    摘要: 本发明涉及一种肝脏细胞的miR-429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用,调节物包括促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物;促进肝细胞增殖的调节物包括促进原癌基因Jun表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物;抑制肝细胞增殖的调节物包括抑制原癌基因Jun表达和/或抑制肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物;调节肝脏细胞药物包括含有促进肝细胞增殖的调节物的药物和/或含有抑制肝细胞增殖的调节物的药物以调节肝细胞的增殖或凋亡。本申请人研究出了miR-429模拟物和miR-429抑制物,二者分别具有显著的抑制肝细胞增殖和促进肝细胞增殖的作用,故可制成相应的药物,来实现对肝细胞的调节。

    基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法

    公开(公告)号:CN105255944A

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201510773582.1

    申请日:2015-11-13

    IPC分类号: C12N15/861 C12N5/10

    摘要: 本发明公开了一种基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法,即通过腺病毒载体转大鼠OPN基因从而达到体外促进大鼠原代肝细胞增殖的方法,包括步骤:(1)大鼠OPN基因的获得;(2)重组腺病毒载体的构建;(3)腺病毒的包装与扩增;(4)大鼠原代肝细胞的分离与培养;(5)腺病毒对大鼠原代肝细胞的体外侵染。本发明提供的方法成本低廉,操作简单,并且能够达到很好的促肝细胞体外增殖的效果。

    一种鉴定忍冬品种的SNP位点组合、引物组合和鉴定忍冬品种的方法

    公开(公告)号:CN116064921A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211657645.3

    申请日:2022-12-22

    摘要: 本发明提供了一种鉴定忍冬品种的SNP位点组合、引物组合和鉴定忍冬品种的方法,涉及基因工程领域,所述SNP位点前后150bp的核苷酸序列如SEQ ID No.1~15所示。本发明方法方便快捷,能在较短的时间内鉴别忍冬新品种,且成本低廉;灵敏度高,将Sanger测序法与构建好的39个忍冬DNA指纹库结合,可有效检验出待检样品与现存忍冬品种的基因型差异;特异性好,本发明根据15个高质量SNP位点序列设计15对引物,具有较高的特异性。本发明对于忍冬新品种的鉴别具有较高的参考价值,适于推广应用。