公开(公告)号：CN117737026A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311780796.2

申请日：2023-12-22

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王燃 ,  陈锋 ,  张兵阳 ,  王潇然 ,  石永春 ,  王东辉 ,  孙丛苇 ,  林法明 ,  余晓东 ,  苏洪毅 ,  徐景楠 ,  宋瑞珂 ,  谢冬 ,  钟强 ,  雷瑞祥

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/82 ,  C12N15/54

Abstract: 本申请属于小麦基因工程技术领域，具体涉及GGPPS定向突变蛋白专利申请事宜。所述GGPPS突变蛋白，与现有如SEQ ID No.1所示小麦GGPPS蛋白氨基酸序列相比，其213位点和/或269位点发生了单位点或双位点突变。本基于组合活性中心饱和突变策略CAST，结合计算机技术对蛋白结构信息的深入模拟，通过对酶蛋白结构与底物相互作用的氨基酸残基的模拟改造，以及通过相关突变体库的构建和筛选，最终实现了对GGPPS结构的进一步优化。基于相关验证实验，不仅证实了相关分析筛选结果的正确性，同时也为进一步的基于基因工程技术的小麦新品种培育奠定了良好的技术基础，同时也为其他作物改良提供了借鉴和参考。

公开(公告)号：CN116732094A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310874873.4

申请日：2023-07-17

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王潇然 ,  周娜 ,  王奥轩 ,  王东辉 ,  石永春 ,  王燃

IPC: C12N15/84 ,  G01N1/31 ,  A01H5/12 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种高效地黄瞬时转化及检测的方法，包括以下步骤：S1：携带有报告基因载体构建并载入根癌农杆菌；S2：农杆菌介导的地黄瞬时转化；S3：GUS组织化学染色；S4：荧光信号检测；S5：瞬时转化地黄叶片的分子检测，采用混合酶切连接法将报告基因序列插入到表达载体中，该报告基因由花椰菜病毒的35S启动子驱动，获得携带报告基因的表达载体，本发明瞬时转化结果的鉴定方法有改进，由于地黄叶片材料本身的原因，导致在进行GUS染色实验时，GUS染液不能成功进入叶片中，导致GUS染色实验无法成功，本发明通过用手术刀柄轻微按压来创造机械损伤，使GUS染液能成功进入叶片，进而成功显色。