公开(公告)号：CN118910213A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410632743.4

申请日：2024-05-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张龙现 ,  张凯慧 ,  黄建营 ,  陈远才 ,  付寅 ,  菅复春 ,  王荣军 ,  张素梅 ,  李俊强 ,  李晓迎 ,  许会燕 ,  毋亚运 ,  赵金凤

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6893 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明提供了一种球虫单个卵囊全基因组DNA扩增和基因组测序的方法，属于寄生虫检测技术领域，所述方法包括下列步骤：S1）纯化球虫卵囊；S2）单卵囊分离及卵囊壁破碎；S3）球虫全基因组DNA扩增；S4）全基因组扩增产物纯化；S5）WGA产物检测；S6）高通量测序分析。本发明利用显微镜和毛细管针精准地分离出单个球虫卵囊，保证了卵囊的纯度；在显微镜下，利用毛细管针刺破球虫卵囊壁，释放出四个孢子囊，未对球虫DNA链造成损伤；经过全基因组扩增获得高质量的扩增基因组，达到第二代及第三代测序要求，球虫基因组达到染色体草图级别且完整度在90%以上。

公开(公告)号：CN117467783A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311054113.5

申请日：2023-08-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张龙现 ,  王艺林 ,  余复昌 ,  李俊强 ,  许会艳 ,  张素梅 ,  付寅 ,  王荣军 ,  菅复春

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测十二指肠贾第虫集聚体A或者B的试剂盒及检测方法，属于病原检测技术领域。本发明提供了基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测十二指肠贾第虫集聚体A或者B的tpi位点的靶点序列，所述靶点序列为十二指肠贾第虫集聚体A的tpi基因位点KM190791的第137 bp～第160 bp位点的核苷酸序列；所述第137 bp～第160 bp位点的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；十二指肠贾第虫集聚体B的tpi基因位点KP687783的第171 bp～第194 bp位点的核苷酸序列；所述第171 bp～第194 bp位点的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。同时本发明还提供了检测十二指肠贾第虫集聚体A或者B的试剂盒，包括权利要求2所述上下游引物对及RPA扩增体系的TwistAmpTM Basic Kit试剂盒及试剂、权利要求4所述的crRNA及CRISPR/Cas12a荧光检测反应体系的试剂及CRISPR/Cas12a试纸条检测反应体系的试剂。