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公开(公告)号：CN114277046A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111528674.5
申请日：2021-12-14
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成四氢嘧啶的三基因串联表达载体的构建及应用。根据同尾酶原理，将假坚强芽孢杆菌中L‑二氨基丁酸转氨酶、L‑二氨基丁酸乙酰转移酶和四氢嘧啶合成酶基因依次插入含相同或不同启动子的质粒pET‑22bNS上，构建三基因串联表达载体pET‑22bNS‑EctA/B/C。将串联表达载体转入大肠杆菌，经IPTG诱导，以重组菌体参与反应3h，其中含载体pET‑22bNS‑EctALac/BTac/CTac的重组菌合成四氢嘧啶的产量最高达20.9mg/mL，其理论合成效率为167.2mg/mL/d。本发明所构建的三基因串联表达载体具有高效合成四氢嘧啶的能力，具有较好的应用价值。
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公开(公告)号：CN111467506A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010161124.3
申请日：2020-03-10
Applicant: 河北师范大学 , 石家庄君乐宝乳业有限公司
Abstract: 本发明提供了植物乳杆菌菌粉调节肥胖大鼠脂代谢和肠道菌群的应用，所述植物乳杆菌菌粉可降低大鼠由高脂饮食诱导升高的体内脂肪含量，降低体脂率；可显著降低高脂饮食诱导升高的大鼠血清FFA含量，同时可降低肥胖大鼠血清中的TG含量，提高HDL-C含量；可改善肥胖大鼠肝脏的脂质代谢功能，抑制肥胖大鼠脂肪酸合成通路的激活；可改善肥胖大鼠肠道菌群紊乱情况，维持肥胖大鼠菌群丰富度、多样性及菌群结构和组成；抑制厚壁菌门相对丰度的升高，提高拟杆菌门的相对丰度，降低高脂饮食条件下大鼠肠道内厚壁菌门与拟杆菌门相对丰度的比值，增加肥胖大鼠与健康大鼠肠道菌群的相似性。
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公开(公告)号：CN110669751A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910691113.3
申请日：2019-07-29
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，通过定点突变技术将腾冲嗜热厌氧菌中丙氨酸消旋酶的173、360两个位点分别突变，构建双点突变表达载体pET-S173Q/Q360Y，通过原核表达、纯化获得酶蛋白。所获得的突变体蛋白对底物L-Ala的表观二级速率常数kcat/Km为18.44 s-1·mM-1，平衡常数Keq(L/D)为3.95，是野生型蛋白的68.30和3.69倍，且突变体蛋白的半衰期也有一定程度的提升。由于突变体蛋白可以提高反应产物D-Ala的转化效率，因此，本突变体可以作为生物合成D-Ala的元器件，有较好的应用价值。
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公开(公告)号：CN103103167A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201310032712.7
申请日：2013-01-29
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列比对结果，通过定点突变技术将原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacterprotophormiae,DSM15035)中D-氨基酸氧化酶的115、119及286三个位点分别突变，构建三点突变表达载体pET-E115A/N119D/T286A，通过原核表达、纯化获得酶蛋白。所获得的突变蛋白对底物D-Met的表观二级速率常数Kcat/Km为1.39×105s-1·M-1，是野生型DAAO的5.03倍，是猪肾来源的pKDAAO蛋白的55.96倍。可以提高对部分D-氨基酸的检测效率，有较好应用价值。
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公开(公告)号：CN103074309A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201210333887.7
申请日：2012-09-11
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，将假坚强芽孢杆菌(Bacilluspseudofirmus)的L-丙氨酸脱氢酶活性中心附近73位赖氨酸通过PCR定点突变为丙氨酸，构建突变体表达载体，通过原核表达及Ni-NTA亲和层析技术纯化得到突变体酶K73A。所获得的突变体酶K73A之比活力是野生型的202%，而其他酶学性质没有变化。突变体酶蛋白对底物L-丙氨酸的转换数Kcat为376.7min-1，对β-NAD+的转换数Kcat为290.1min-1，分别是野生型的2.0和2.1倍。可用于改善生物法生产丙酮酸及L/D-丙氨酸等的生产工艺。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114277046B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202111528674.5
申请日：2021-12-14
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成四氢嘧啶的三基因串联表达载体的构建及应用。根据同尾酶原理，将假坚强芽孢杆菌中L‑二氨基丁酸转氨酶、L‑二氨基丁酸乙酰转移酶和四氢嘧啶合成酶基因依次插入含相同或不同启动子的质粒pET‑22bNS上，构建三基因串联表达载体pET‑22bNS‑EctA/B/C。将串联表达载体转入大肠杆菌，经IPTG诱导，以重组菌体参与反应3h，其中含载体pET‑22bNS‑EctALac/BTac/CTac的重组菌合成四氢嘧啶的产量最高达20.9mg/mL，其理论合成效率为167.2mg/mL/d。本发明所构建的三基因串联表达载体具有高效合成四氢嘧啶的能力，具有较好的应用价值。
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公开(公告)号：CN116622868A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310486777.2
申请日：2023-05-04
Applicant: 河北师范大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/46
Abstract: 本发明提供了一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测鲟源海豚链球菌的引物、探针及其试剂盒和应用，属于基因检测技术领域。本发明提供了一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测鲟源海豚链球菌的引物探针组，包括SEQ ID NO:1所示的正向引物、SEQ ID NO:2所示的反向引物和SEQ ID NO:3所示的探针。本发明将RRA技术与荧光检测相结合，从临床判断为感染或疑似感染海豚链球菌组织中快速准确地检测出海豚链球菌。本发明提供的检测方法从常见致病菌中特异性检测到海豚链球菌，体现出较强特异性和较高的检测灵敏度，对海豚链球菌的早期诊断和治疗具有重要意义，同时可免除昂贵仪器的投入，便于在基层推广使用。
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公开(公告)号：CN113262265B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202110647844.5
申请日：2021-06-10
Applicant: 河北师范大学
IPC: A61K36/8945 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P3/10 , A61K31/194 , A61K31/733
Abstract: 本发明提供了一种用于预防II型糖尿病的益生菌组合物制备方法，包括如下步骤：A、将植物乳杆菌N3117接种至MRS液体培养基中，35～40℃厌氧增殖培养44～52h后，得到发酵菌液；B、将上述发酵菌液离心分离，收集沉淀物，得到菌泥；C、向上述菌泥中添加冻干保护剂溶液，经乳化后真空冷冻干燥、粉碎过筛，得到植物乳杆菌N3117菌粉；D、将上述植物乳杆菌N3117菌粉与南瓜粉、山药粉、菊粉、柠檬酸粉混合，得到益生菌组合物。本发明采用益生菌组合物，其具有植物乳杆菌N3117的基本特性和生物学功能，与植物乳杆菌N3117菌粉相比，益生菌组合物配方配比合理，可充分发挥各成分的功能性，具有活菌数高、稳定性强、保存容易等优点。
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公开(公告)号：CN113862228A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111142001.6
申请日：2021-09-28
Abstract: 本发明属于噬藻体领域，具体涉及一种广谱烈性噬藻体Microcystis aeruginosa cyanophage MinS1（MinS1）及其应用，该噬藻体于2021年9月7日保藏于微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.23089。本发明的裂解性噬藻体感染多种蓝藻后，可以在宿主内进行增殖并使宿主裂解，其广谱性使其具有巨大的应用潜力；该噬藻体是从自然水域中分离所得，可安全、高效的裂解淡水中诸多蓝藻，对环境和人类不会产生危害；同时该噬藻体培养条件简单，易扩大，在预防和治理蓝藻造成的水华方面具有潜在的应用价值，可作为一种潜在的新型治理蓝藻水华的“控藻产品”和手段。
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公开(公告)号：CN105087616A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510573418.6
申请日：2015-09-10
Applicant: 河北师范大学
Abstract: 本发明公开了一种猪肺炎支原体的融合基因及其制备方法，属于基因工程技术领域，本发明中所使用的P46和P65基因，直接根据NCBI GeneBank中发布的编码区序列，设计含有相应酶切位点的特异性引物。P46基因的PCR产物和原核表达载体pET-28a双酶切并连接，构建重组表达载体pET-28a-P46；再令重组表达载体pET-28a-P46和P65基因的PCR产物双酶切并连接，直接构建重组表达载体pET-28a-P46-P65。优势是不需要使用Linker连接P46和P65基因，直接经过双酶切连接就可得到重组表达载体pET-28a-P46-P65。重组载体构建过程相较于，使用Linker连接基因再与原核表达载体连接，过程简单并且易于得到，耗费时间明显减少。
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