公开(公告)号：CN101624421A

公开(公告)日：2010-01-13

申请号：CN200910184043.9

申请日：2009-08-12

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 王永山 ,  欧阳伟 ,  周宇 ,  王晓丽 ,  何孔旺 ,  张海彬 ,  范红结 ,  王忠灿 ,  唐雨德

IPC: C07K14/08 ,  C12N15/85 ,  C12P21/02 ,  C07K1/36 ,  G01N33/543 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及传染性法氏囊病病毒变异株VP2基因病毒样颗粒重组蛋白，属于生物制药领域。将IBDV变异株(AH1)VP2基因，克隆、转化、转染，获得重组杆状病毒vBac-VP2。感染的Sf9昆虫细胞具有特异性荧光，抗原效价在1.6×10 3 以上，重组VP2蛋白分子量53kDa，在感染细胞中呈病毒样颗粒形态。用纯化的重组VP2蛋白为包被抗原建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性和敏感性；免疫鸡，可抵抗IBDV强毒攻击，保护率达到100％。本发明用IBDV变异株VP2基因制备的新型病毒样颗粒重组VP2蛋白对当前IBDV流行毒株的免疫预防针对性更高，具有良好的实用价值和推广前景。

公开(公告)号：CN101487011A

公开(公告)日：2009-07-22

申请号：CN200910025577.7

申请日：2009-02-10

Applicant: 江苏省农业科学院 ,  中国人民解放军南京军区军事医学研究所

Inventor： 王永山 ,  王忠灿 ,  唐雨德 ,  谭维国 ,  潘英 ,  施正良 ,  欧阳伟 ,  李银 ,  王晓丽 ,  潘群兴 ,  夏兴霞 ,  诸玉梅 ,  张改平 ,  王选年 ,  陈光华

IPC: C12N15/40 ,  C07K14/08 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  G01N33/531 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及模拟IBDV多表位基因的分子设计及其应用，属于生物制药领域。根据对免疫保护有效的抗原表位基序设计合成具有免疫保护功能的模拟IBDV多表位基因epis，运用基因工程技术构建重组表达质粒pET－epis，使epis基因在大肠杆菌中表达，然后以大肠杆菌表达的重组IBDV多表位蛋白rEPIS作为抗原，加上相应的佐剂制成IBDV表位基因工程疫苗，可用于预防控制传染性法氏囊病。在进行epis分子设计时，由于采用线性化序列模拟了IBDV空间构象依赖性表位基序，因此重组大肠杆菌表达的rEPIS制备工艺简单、成本低、生物安全性高。

公开(公告)号：CN101818162A

公开(公告)日：2010-09-01

申请号：CN200910232402.3

申请日：2009-11-27

Applicant: 中国人民解放军南京军区军事医学研究所 ,  江苏省农业科学院

Inventor： 王忠灿 ,  王永山 ,  刘小娟 ,  欧阳伟 ,  王晓丽 ,  诸玉梅 ,  唐雨德

IPC: C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  G01N33/569 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及IBDV抗原表位与HBcAg嵌合基因的分子设计，属于生物制药领域。运用重叠延伸PCR技术，构建HBcAg修饰基因表达质粒pET-mHBc。将传染性法氏囊病病毒多表位基因5epis定向插入到该表达质粒mHBc基因中，获得表达质粒pEt-mHBc-5epis，在大肠杆菌中表达。重组嵌合蛋白的分子量约29kDa，表达量约占菌体总蛋白的47.6％；呈病毒样颗粒直径约60nm～80nm；抗原效价达到2.0×102。本发明构建成功5epis与HBcAg嵌合基因，在大肠杆菌中高效表达了具有IBDV抗原反应性的重组嵌合蛋白并形成了病毒样颗粒，具有成为颗粒化表位型IBD基因工程疫苗的应用前景。