公开(公告)号：CN1292254C

公开(公告)日：2006-12-27

申请号：CN200510038211.5

申请日：2005-01-24

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  彭小华 ,  王芳 ,  邱索平 ,  张雪寒 ,  倪艳秀 ,  郭容利 ,  俞正玉 ,  陆承平

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/31 ,  C12Q1/04 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  C07K14/36

Abstract: 一种检测胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae，App)野毒感染的试剂盒，其组成成分如下：细菌毒素ApxIV纯化表达蛋白包被好的酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG抗体、柠檬酸、碳酸氢二钠、EDTA缓冲系统加TMB构成的显色系统、阳性血清、阴性血清和试剂盒说明书。其特征是利用聚合酶链反应(PCR)从App血清1型的ApxIV基因中扩增出目的基因，构建了含目的基因的表达质粒pET32a-ApxIV，该质粒转化入宿主菌BL21(DE3)，体外表达蛋白经镍柱纯化后作为抗原，建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法并优化反应条件形成了检测试剂盒，该试剂盒在App的诊断、流行病学调查和免疫监测等方面具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN1645148A

公开(公告)日：2005-07-27

申请号：CN200510038211.5

申请日：2005-01-24

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  彭小华 ,  王芳 ,  邱索平 ,  张雪寒 ,  倪艳秀 ,  郭容利 ,  俞正玉 ,  陆承平

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  G01N33/52 ,  C07H19/00 ,  C07H21/00

Abstract: 一种检测胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropeumoniae，App)野毒感染的试剂盒，其组成成分如下：细菌毒素ApxIV纯化表达蛋白包被好的酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG抗体、柠檬酸、碳酸氢二钠、EDTA缓冲系统加TMB构成的显色系统、阳性血清、阴性血清和试剂盒说明书。其特征是利用聚合酶链反应(PCR)从App血清1型的ApxIV基因中扩增出目的基因，构建了含目的基因的表达质粒pET32a－ApxIV，该质粒转化入宿主菌BL21(DE3)，体外表达蛋白经镍柱纯化后作为抗原，建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法并优化反应条件形成了检测试剂盒，该试剂盒在App的诊断、流行病学调查和免疫监测等方面具有重要应用价值。