公开(公告)号：CN117925548A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202311680120.6

申请日：2023-12-08

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  郑晨妮 ,  魏婉清 ,  宋伟 ,  吴静 ,  刘佳 ,  陈修来 ,  高聪

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12P13/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种用于合成5‑羟基‑L‑高亮氨酸的Fe(II)/α‑KG双加氧酶突变体及应用，属于生物工程技术领域。本发明通过理性蛋白质工程对BlAH的蛋白质结构进行改造，克服了野生型BlAH对L‑高亮氨酸C4的高催化活性，成功实现利用突变体酶进行5‑羟基‑L‑高亮氨酸的生物合成，其中该突变体催化活性是野生型的27倍。以100mM L‑高亮氨酸为底物规模化制备5‑羟基‑L‑高亮氨酸，对应产物摩尔浓度为97.6mM，产物转化率为97.6％，为基于天然氨基酸底物合成多样化的非天然氨基酸提供新的合成方法。