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公开(公告)号:CN119842771A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510115677.8
申请日:2025-01-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/113 , C12P13/22 , C12P19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑associated transposases基因编辑工具的构建与优化及其在大肠杆菌中的应用,属于合成生物学与基因工程领域。本发明在大肠杆菌中建立了高效的基因编辑系统,经过元件优化降低了MUSCULAR‑CAST系统对菌株的负担;通过消除自靶向作用可高效整合大片段(>10k bp)目的基因表达框,并提高本基因编辑系统的可编程度。本发明将MUSCULAR‑CAST基因编辑系统用于构建生产3‑岩藻糖基乳糖、L‑色氨酸、2’‑岩藻糖基乳糖、新四糖的底盘菌株,可使底盘菌株相较于质粒表达产量相当或更高,且生长状况更为良好或转化率更高。