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公开(公告)号：CN105506136B
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201610040179.2
申请日：2016-01-21
Applicant: 武汉顺可达生物科技有限公司 , 武汉大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6876
Abstract: 本发明涉及一种检测microRNA的方法和试剂盒：向含microRNA的体系中加入microRNA检测探针，探针末端区域与靶标microRNA以碱基配对的方式结合，再加入T4 DNA连接酶，使探针的3’端和5’端连接起来，形成环状结构；然后加入5’端修饰有生物素的DNA引物，并加入Phi 29 DNA聚合酶，进行滚环扩增；扩增结束后，将链霉亲和素磁珠加入到待测体系中，利用铁磁体钓取后洗脱；随后，将修饰有DNA的上转换材料加入到待测体系中，上转换材料上的单链DNA与磁珠上钓取出的引物DNA以碱基配对结合，孵育后，利用铁磁体将磁珠吸附，洗脱掉未配对结合的上转换材料，留下的磁珠吸附的上转换材料部分作为信号输出；最后，在荧光分光光度计上，使用980nm的激发光激发，得到上转换材料的荧光信号来检测microRNA含量。
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公开(公告)号：CN105506136A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610040179.2
申请日：2016-01-21
Applicant: 武汉顺可达生物科技有限公司 , 武汉大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种检测microRNA的方法和试剂盒：向含microRNA的体系中加入microRNA检测探针，探针末端区域与靶标microRNA以碱基配对的方式结合，再加入T4 DNA连接酶，使探针的3’端和5’端连接起来，形成环状结构；然后加入5’端修饰有生物素的DNA引物，并加入Phi 29 DNA聚合酶，进行滚环扩增；扩增结束后，将链霉亲和素磁珠加入到待测体系中，利用铁磁体钓取后洗脱；随后，将修饰有DNA的上转换材料加入到待测体系中，上转换材料上的单链DNA与磁珠上钓取出的引物DNA以碱基配对结合，孵育后，利用铁磁体将磁珠吸附，洗脱掉未配对结合的上转换材料，留下的磁珠吸附的上转换材料部分作为信号输出；最后，在荧光分光光度计上，使用980nm的激发光激发，得到上转换材料的荧光信号来检测microRNA含量。
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公开(公告)号：CN105968157B
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201610283596.X
申请日：2016-04-29
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明属于癌症的分子诊断领域，具体涉及一种检测癌症部位的方法和试剂盒：向含有癌细胞或者癌组织的体系中加入光激活适配子荧光探针，探针与癌细胞上的靶标特异性地结合，孵育一段时间后，将多余探针洗去，使用激光共聚焦荧光显微镜对待测样品进行扫描并拍照，得到光激活前的荧光图像；随后，使用一定波长的激发光照射待测样品，使探针被光激活，使用激光共聚焦荧光显微镜对待测样品进行扫描并拍照，得到光激活后的荧光图像；最后，将光激发前后的信号图像进行比较，荧光增强的部位即为癌症部位。具有很高的灵敏度；另外，荧光小分子只有在光激活后才会转变成荧光很强的结构，这一定程度上克服了光漂白的问题。
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公开(公告)号：CN102618664A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210133660.8
申请日：2012-05-03
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明涉及一种miRNA检测探针和可视化检测miRNA的方法。本发明的miRNA检测探针包括三个部分：靠近3'端为G-四链体形成序列，中间是待测靶标miRNA互补序列，5'端为干扰序列。探针在通常条件下为hairpin结构，加入靶标后，由于DNA-RNA杂合体的碱基对数与稳定性均高于干扰序列形成的DNA双链，hairpin结构将打开。打开的hairpin结构在双链特异内切酶的作用下可释放出G-四链体形成序列，再在钠钾离子作用下使之形成G-四链体，与Hemin组装从而产生有过氧化物酶活性的催化剂。本发明检测miRNA的方法只需一条探针，产生的信号可视化，而且不需昂贵仪器。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119506399A
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411732751.2
申请日：2024-11-29
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6886 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本申请公开了一种提取肿瘤、传染病体液游离核酸的方法、试剂盒及应用。本申请提供的提取方法提取效率高；通过对比，其提取质量是传统剂盒提取的10倍。本申请提供的试剂盒包括特异性MOF吸附试剂、裂解液、分离剂、核酸保存管，其中特异性MOF吸附试剂能够通过特异性免疫磁珠来对患者体液中的游离核酸进行捕获，然后通过裂解液、分离剂将游离核酸分离提取出来。通过本申请所提供的试剂盒能够针对性地提取肿瘤或传染病体液中的游离核酸，排除了其它正常细胞DNA的干扰，可用于PCR扩增、基因表达、基因测序、芯片检测、文库构建、高通量测序等科研或临床诊断分析，使得后续的检测结果更精准，检出效果更好。
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公开(公告)号：CN119372318A
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202411732580.3
申请日：2024-11-29
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/6886
Abstract: 本申请公开了一种用于检测肝癌的标志物及应用，属于肝癌诊断技术领域。该标志物包括C1QTNF4、SETBP1、HMGA1、PCDHB3、CYBA、ZNF541中至少一个细胞外游离RNA(cfRNA)，本申请通过在健康人群、HCC患者和肝癌患者进行验证，证明这6种标志物水平在组间存在显著性差异并具有稳定性，适合从乙型肝炎的高危人群中发现尚未出现临床症状的早期肝癌患者，起到早发现的效果。本申请还提供的诊断肝癌高危人群或肝癌早期诊断试剂盒，该试剂盒能够进一步实现肝癌的个体化诊断，通过取血检测就能实现诊断，无需额外采集组织样本，大大减少创伤风险，更适合早期肝癌大规模人群筛查，具有良好的临床使用和推广价值。
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公开(公告)号：CN102899417A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201210411766.X
申请日：2012-10-24
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明涉及一种microRNA荧光检测探针，该探针为折叠结构，包括：末端区，该区域为双链结构；环状区，为单链结构，包括待测靶标的互补序列以及间隔序列，间隔序列不与探针的其它序列形成二级结构。该探针末端区能保持探针折叠型结构的相对稳定，在加入含有检测对象的样品时，折叠型结构打开，加入与检测探针的末端区互补的引物，并加入不具外切酶活性的DNA聚合酶，通过引物延伸以及相应的链置换释放出microRNA，并使探针恢复产生荧光信号，通过产生的检测荧光信号来检测相应的靶microRNA。通过设计针对不同RNA的探针且标记不同的荧光，则可以实现不同microRNA的同时检测。
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公开(公告)号：CN105968157A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610283596.X
申请日：2016-04-29
Applicant: 武汉大学
CPC classification number: C07H21/04 , C09K11/06 , C09K2211/1044 , C09K2211/1059 , C09K2211/1088 , G01N21/6486
Abstract: 本发明属于癌症的分子诊断领域，具体涉及一种检测癌症部位的方法和试剂盒：向含有癌细胞或者癌组织的体系中加入光激活适配子荧光探针，探针与癌细胞上的靶标特异性地结合，孵育一段时间后，将多余探针洗去，使用激光共聚焦荧光显微镜对待测样品进行扫描并拍照，得到光激活前的荧光图像；随后，使用一定波长的激发光照射待测样品，使探针被光激活，使用激光共聚焦荧光显微镜对待测样品进行扫描并拍照，得到光激活后的荧光图像；最后，将光激发前后的信号图像进行比较，荧光增强的部位即为癌症部位。具有很高的灵敏度；另外，荧光小分子只有在光激活后才会转变成荧光很强的结构，这一定程度上克服了光漂白的问题。
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公开(公告)号：CN102618664B
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201210133660.8
申请日：2012-05-03
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明涉及一种miRNA检测探针和可视化检测miRNA的方法。本发明的miRNA检测探针包括三个部分：靠近3'端为G-四链体形成序列，中间是待测靶标miRNA互补序列，5'端为干扰序列。探针在通常条件下为hairpin结构，加入靶标后，由于DNA-RNA杂合体的碱基对数与稳定性均高于干扰序列形成的DNA双链，hairpin结构将打开。打开的hairpin结构在双链特异内切酶的作用下可释放出G-四链体形成序列，再在钠钾离子作用下使之形成G-四链体，与Hemin组装从而产生有过氧化物酶活性的催化剂。本发明检测miRNA的方法只需一条探针，产生的信号可视化，而且不需昂贵仪器。
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