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公开(公告)号：CN118345061A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410598431.6
申请日：2024-05-15
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6886 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种AsCpf1突变体蛋白及NPM1基因突变检测试剂盒，属于生物技术领域。AsCpf1突变体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其具有在其他突变体蛋白中未报道过的PAM特性(NNCV和TTTV偏好性)，其宽广的PAM识别范围而易于对任何基因位点设计crRNA，扩展了其应用范围。NPM1基因突变检测试剂盒包含：针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变位点的ERA引物、针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变的crRNA，AsCpf1突变体蛋白，单链DNA荧光报告分子；该试剂盒可仅使用一种crRNA检测NPM1基因c.863_864四碱基插入的各种突变亚型。
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公开(公告)号：CN113584167B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202110765354.5
申请日：2021-07-07
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/113 , G01N33/543 , G01N33/533 , G01N33/558
Abstract: 本发明提供了一种用于检测FLT3‑F691L突变的crRNA、等温扩增引物和试剂盒，所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；用于检测FLT3‑F691L突变的等温扩增引物，包括如SEQ ID NO.13所示的上游引物和如SEQ ID NO.16所示的下游引物；所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas12a蛋白、荧光探针和所述等温扩增引物。本发明首次采用CRISPR荧光法检测FLT3基因F691L突变，具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。
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公开(公告)号：CN118345061B
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410598431.6
申请日：2024-05-15
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6886 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种AsCpf1突变体蛋白及NPM1基因突变检测试剂盒，属于生物技术领域。AsCpf1突变体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其具有在其他突变体蛋白中未报道过的PAM特性(NNCV和TTTV偏好性)，其宽广的PAM识别范围而易于对任何基因位点设计crRNA，扩展了其应用范围。NPM1基因突变检测试剂盒包含：针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变位点的ERA引物、针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变的crRNA，AsCpf1突变体蛋白，单链DNA荧光报告分子；该试剂盒可仅使用一种crRNA检测NPM1基因c.863_864四碱基插入的各种突变亚型。
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公开(公告)号：CN113584167A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110765354.5
申请日：2021-07-07
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/113 , G01N33/543 , G01N33/533 , G01N33/558
Abstract: 本发明提供了一种用于检测FLT3‑F691L突变的crRNA、等温扩增引物和试剂盒，所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；用于检测FLT3‑F691L突变的等温扩增引物，包括如SEQ ID NO.13所示的上游引物和如SEQ ID NO.16所示的下游引物；所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas12a蛋白、荧光探针和所述等温扩增引物。本发明首次采用CRISPR荧光法检测FLT3基因F691L突变，具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。
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