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公开(公告)号:CN118345061B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410598431.6
申请日:2024-05-15
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6886 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种AsCpf1突变体蛋白及NPM1基因突变检测试剂盒,属于生物技术领域。AsCpf1突变体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其具有在其他突变体蛋白中未报道过的PAM特性(NNCV和TTTV偏好性),其宽广的PAM识别范围而易于对任何基因位点设计crRNA,扩展了其应用范围。NPM1基因突变检测试剂盒包含:针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变位点的ERA引物、针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变的crRNA,AsCpf1突变体蛋白,单链DNA荧光报告分子;该试剂盒可仅使用一种crRNA检测NPM1基因c.863_864四碱基插入的各种突变亚型。
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公开(公告)号:CN119144722A
公开(公告)日:2024-12-17
申请号:CN202411501073.9
申请日:2024-10-25
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种DNMT3A基因突变检测试剂盒和检测方法,属于基因检测领域。本发明试剂盒包含序列如SEQ ID NO.5、10所示的针对DNMT3A基因R882位点的ERA引物、靶向R882H/C突变的crRNA、Cas12a蛋白和单链DNA荧光报告分子,还可进一步包含AciI限制酶、ERA试剂、DNMT3A基因R882位点突变阳性标准品。本发明通过ERA的高效扩增和AciI内切酶的切割,将ERA等温扩增与限制酶切同步化,产生大量R882突变富集的扩增产物,扩增产物通过CRISPR/Cas12a进一步提高了传感性能,从而使本发明具有准确性好、灵敏度高、选择性强、抗干扰能力强、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN118345061A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410598431.6
申请日:2024-05-15
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6886 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种AsCpf1突变体蛋白及NPM1基因突变检测试剂盒,属于生物技术领域。AsCpf1突变体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其具有在其他突变体蛋白中未报道过的PAM特性(NNCV和TTTV偏好性),其宽广的PAM识别范围而易于对任何基因位点设计crRNA,扩展了其应用范围。NPM1基因突变检测试剂盒包含:针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变位点的ERA引物、针对NPM1基因c.863_864四碱基插入突变的crRNA,AsCpf1突变体蛋白,单链DNA荧光报告分子;该试剂盒可仅使用一种crRNA检测NPM1基因c.863_864四碱基插入的各种突变亚型。
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