公开(公告)号：CN115896259B

公开(公告)日：2025-02-21

申请号：CN202211144609.7

申请日：2022-09-20

Applicant: 武汉大学中南医院

Inventor： 刘亮 ,  张驰 ,  吴建华 ,  杨坤 ,  陈思怡 ,  汪辰龙 ,  刘云坤 ,  卢云

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种分子信标‑多肽探针及其应用，该分子信标‑多肽探针包括与目标miRNA互补的环部、包含一段双链和一段单链的茎部；双链的3’末端A碱基上连有生物素，与其互补的T碱基上连有报告多肽；单链沿双链连报告多肽的一侧多核苷酸延伸，其含有切口酶识别位点，末端含硫代磷酸酯键修饰的碱基。分子信标‑多肽探针环部与目标miRNA结合后形成DNA‑RNA杂交双链，在DNA聚合酶的作用下合成一条新DNA，替换掉miRNA，形成DNA‑DNA杂交环，其在切口酶作用下被切割掉含硫代磷酸酯键修饰的碱基，暴露出核酸外切酶识别位点，核酸外切酶将其一边单链切割为碎片并使与环部互补的DNA单链和报告多肽游离出来，DNA单链进入下一个循环，循环结束后报告多肽通过质谱SRM进行定量。

公开(公告)号：CN116087524A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202210908561.6

申请日：2022-07-29

Applicant: 武汉大学中南医院

Inventor： 刘亮 ,  孙波 ,  卢云 ,  李文婧 ,  汪辰龙 ,  刘云坤

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/574 ,  C12Q1/44 ,  C12Q1/37

Abstract: 本申请涉及生物检测技术领域，特别涉及一种基于双探针原位定量检测目标蛋白质特异性糖基化的方法。本申请提供的方法包括以下步骤:利用蛋白质探针和聚糖探针分别与目标蛋白质及目标聚糖结合，结合后的空间临近关系触发同一目标蛋白质上的探针之间杂交形成杂交双链；所述蛋白质探针的DNA酶在金属辅因子的作用下酶切所述杂交双链上的聚糖探针；通过对酶切后的聚糖探针释放的报告肽进行质谱定量分析，从而将蛋白质特异性糖型的信号转化为质谱信号。

公开(公告)号：CN115896259A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211144609.7

申请日：2022-09-20

Applicant: 武汉大学中南医院

Inventor： 刘亮 ,  张驰 ,  吴建华 ,  杨坤 ,  陈思怡 ,  汪辰龙 ,  刘云坤 ,  卢云

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种分子信标‑多肽探针及其应用，该分子信标‑多肽探针包括与目标miRNA互补的环部、包含一段双链和一段单链的茎部；双链的3’末端A碱基上连有生物素，与其互补的T碱基上连有报告多肽；单链沿双链连报告多肽的一侧多核苷酸延伸，其含有切口酶识别位点，末端含硫代磷酸酯键修饰的碱基。分子信标‑多肽探针环部与目标miRNA结合后形成DNA‑RNA杂交双链，在DNA聚合酶的作用下合成一条新DNA，替换掉miRNA，形成DNA‑DNA杂交环，其在切口酶作用下被切割掉含硫代磷酸酯键修饰的碱基，暴露出核酸外切酶识别位点，核酸外切酶将其一边单链切割为碎片并使与环部互补的DNA单链和报告多肽游离出来，DNA单链进入下一个循环，循环结束后报告多肽通过质谱SRM进行定量。