公开(公告)号：CN115896259B

公开(公告)日：2025-02-21

申请号：CN202211144609.7

申请日：2022-09-20

Applicant: 武汉大学中南医院

Inventor： 刘亮 ,  张驰 ,  吴建华 ,  杨坤 ,  陈思怡 ,  汪辰龙 ,  刘云坤 ,  卢云

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种分子信标‑多肽探针及其应用，该分子信标‑多肽探针包括与目标miRNA互补的环部、包含一段双链和一段单链的茎部；双链的3’末端A碱基上连有生物素，与其互补的T碱基上连有报告多肽；单链沿双链连报告多肽的一侧多核苷酸延伸，其含有切口酶识别位点，末端含硫代磷酸酯键修饰的碱基。分子信标‑多肽探针环部与目标miRNA结合后形成DNA‑RNA杂交双链，在DNA聚合酶的作用下合成一条新DNA，替换掉miRNA，形成DNA‑DNA杂交环，其在切口酶作用下被切割掉含硫代磷酸酯键修饰的碱基，暴露出核酸外切酶识别位点，核酸外切酶将其一边单链切割为碎片并使与环部互补的DNA单链和报告多肽游离出来，DNA单链进入下一个循环，循环结束后报告多肽通过质谱SRM进行定量。

公开(公告)号：CN115896259A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211144609.7

申请日：2022-09-20

Applicant: 武汉大学中南医院

Inventor： 刘亮 ,  张驰 ,  吴建华 ,  杨坤 ,  陈思怡 ,  汪辰龙 ,  刘云坤 ,  卢云

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种分子信标‑多肽探针及其应用，该分子信标‑多肽探针包括与目标miRNA互补的环部、包含一段双链和一段单链的茎部；双链的3’末端A碱基上连有生物素，与其互补的T碱基上连有报告多肽；单链沿双链连报告多肽的一侧多核苷酸延伸，其含有切口酶识别位点，末端含硫代磷酸酯键修饰的碱基。分子信标‑多肽探针环部与目标miRNA结合后形成DNA‑RNA杂交双链，在DNA聚合酶的作用下合成一条新DNA，替换掉miRNA，形成DNA‑DNA杂交环，其在切口酶作用下被切割掉含硫代磷酸酯键修饰的碱基，暴露出核酸外切酶识别位点，核酸外切酶将其一边单链切割为碎片并使与环部互补的DNA单链和报告多肽游离出来，DNA单链进入下一个循环，循环结束后报告多肽通过质谱SRM进行定量。