快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒

    公开(公告)号:CN101497926A

    公开(公告)日:2009-08-05

    申请号:CN200810236989.0

    申请日:2008-12-23

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒,涉及一种性传播疾病病原体基因检测试剂盒。本发明主要包括:1)DNA核酸提取液;2)含有三种病原体检测序列的阳性质粒,三种病原体包括沙眼衣原体、细小脲原体以及解脲脲原体;3)一步法单管单酶多项联合检测的TaqManPCR扩增体系。本发明特异性好,灵敏度高,定量准确;检测速度快;使用步骤简单,可重复性高;可同时进行高通量的样品检测;不仅可对沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体进行同步定量检测,并可替代一直沿用的传统的培养法和ELISA(酶联免疫吸附试验)诊断方法。

    同步检测肝炎、艾滋病毒和梅毒螺旋体核酸的试剂盒

    公开(公告)号:CN101487062A

    公开(公告)日:2009-07-22

    申请号:CN200810197485.2

    申请日:2008-10-31

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测肝炎、艾滋病毒和梅毒螺旋体核酸的试剂盒,涉及一种基因诊断试剂盒。本发明包括:1)病原体浓缩液和DNA、RNA核酸同步提取液;2)含有四种病原体检测序列的阳性质粒,四种病原体包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病毒以及梅毒螺旋体;3)一步法单管单酶多项联合检测的TaqMan PCR扩增体系。本发明同步实时检测;整个流程时间短,能效高;操作简单,封闭性检测,避免了可能的污染和人为误差;灵敏度高;适用于大规模高通量的血液筛查,如血液中心和生物制品生产企业开展核酸筛查,也可适用于大容量高效率的临床核酸检验。

    一种莲藕组织总RNA的快速提取方法

    公开(公告)号:CN1284852C

    公开(公告)日:2006-11-15

    申请号:CN200410060812.1

    申请日:2004-09-09

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种莲藕组织总RNA的快速提取方法。其步骤是:首先是对实验药品的配制及实验用品的处理;其次是取材,取莲藕幼嫩的叶及与叶相连的叶柄;第三是抽提,沉淀,离心得到总RNA;第四是总RNA的鉴定,分别用紫外分光光度计和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测。根据所得数据及电泳结果,表明所得莲藕组织总RNA完整性好、纯度高并且产率高。本发明实验过程简便,操作方便、安全,结果准确、有效,重复性好,该方法也适用于富含多糖、多酚的其它物种的植物组织总RNA的提取。

    一种恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法及其应用

    公开(公告)号:CN104232579B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410510022.2

    申请日:2014-09-28

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法,具体为分离外周血单个核细胞,收集的外周血单个核细胞用PBS重悬、洗涤2次,洗过的细胞经离心回收,每次1200 rpm离心8 min,最后用含2%?4%猴自体血清、1%青链霉素和1‰HEPES的RPMI 1640培养液重悬,重悬的细胞的密度在3×106个细胞/ml,立即加入到CELLBIND Surface的96孔培养板,0.8×106个细胞/孔,或48孔培养板,3×106个细胞/孔中培养,24h后将未贴壁细胞用RPMI 1640培养液洗弃,之后用含2%?4%猴自体血清的完全培养基继续培养贴壁的细胞,以后每2~3天换一次培养液,7天后观察细胞形态,判定细胞分化结果。分化培养得到的恒河猴单核巨噬细胞纯度高,具有典型巨噬细胞形态学和免疫学特性。该方法简单、经济、有效。

    一种恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法及其应用

    公开(公告)号:CN104232579A

    公开(公告)日:2014-12-24

    申请号:CN201410510022.2

    申请日:2014-09-28

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法,具体为分离外周血单个核细胞,收集的外周血单个核细胞用PBS重悬、洗涤2次,洗过的细胞经离心回收,每次1200rpm离心8min,最后用含2%-4%猴自体血清、1%青链霉素和1‰HEPES的RPMI1640培养液重悬,重悬的细胞的密度在3×106个细胞/ml,立即加入到CELLBINDSurface的96孔培养板,0.8×106个细胞/孔,或48孔培养板,3×106个细胞/孔中培养,24h后将未贴壁细胞用RPMI1640培养液洗弃,之后用含2%-4%猴自体血清的完全培养基继续培养贴壁的细胞,以后每2~3天换一次培养液,7天后观察细胞形态,判定细胞分化结果。分化培养得到的恒河猴单核巨噬细胞纯度高,具有典型巨噬细胞形态学和免疫学特性。该方法简单、经济、有效。

    快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒

    公开(公告)号:CN101497926B

    公开(公告)日:2012-02-29

    申请号:CN200810236989.0

    申请日:2008-12-23

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速同步检测沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体的试剂盒,涉及一种性传播疾病病原体基因检测试剂盒。本发明主要包括:1)DNA核酸提取液;2)含有三种病原体检测序列的阳性质粒,三种病原体包括沙眼衣原体、细小脲原体以及解脲脲原体;3)一步法单管单酶多项联合检测的TaqManPCR扩增体系。本发明特异性好,灵敏度高,定量准确;检测速度快;使用步骤简单,可重复性高;可同时进行高通量的样品检测;不仅可对沙眼衣原体、细小脲原体和解脲脲原体进行同步定量检测,并可替代一直沿用的传统的培养法和ELISA(酶联免疫吸附试验)诊断方法。

    快速检测日本血吸虫的荧光定量PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN101131347A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710053121.2

    申请日:2007-09-04

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测日本血吸虫的荧光定量PCR试剂盒,涉及一种人畜共患传染病病原体的基因检测技术,适用于日本血吸虫定性定量检测。本发明由DNA提取液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板PU-SJ、阴性质控标准品组成;荧光定量PCR反应液含有日本血吸虫特异性引物对和荧光探针。本发明定量准确;检测速度快;特异性好,灵敏度高;可鉴定区别检测日本血吸虫和中华血吸虫;使用步骤简单,可重复性高;可以对含有日本血吸虫群全部三个种的核酸样品进行定性定量检测,可以替代传统的病原学方法、检测血吸虫幼虫尾蚴的钉螺压碎法和逸蚴法。

    同步检测肝炎、艾滋病毒和梅毒螺旋体核酸的试剂盒

    公开(公告)号:CN101487062B

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN200810197485.2

    申请日:2008-10-31

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测肝炎、艾滋病毒和梅毒螺旋体核酸的试剂盒,涉及一种基因诊断试剂盒。本发明包括:1)病原体浓缩液和DNA、RNA核酸同步提取液;2)含有四种病原体检测序列的阳性质粒,四种病原体分别是乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病毒以及梅毒螺旋体;3)一步法单管单酶多项联合检测的TaqMan PCR扩增体系。本发明同步实时检测;整个流程时间短,能效高;操作简单,封闭性检测,避免了可能的污染和人为误差;灵敏度高;适用于大规模高通量的血液筛查,如血液中心和生物制品生产企业开展核酸筛查,也可适用于大容量高效率的临床核酸检验。

    一种莲藕组织总RNA的快速提取方法

    公开(公告)号:CN1587405A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410060812.1

    申请日:2004-09-09

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种莲藕组织总RNA的快速提取方法。其步骤是:首先是对实验药品的配制及实验用品的处理;其次是取材,取莲藕幼嫩的叶及与叶相连的叶柄;第三是抽提,沉淀,离心得到总RNA;第四是总RNA的鉴定,分别用紫外分光光度计和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测。根据所得数据及电泳结果,表明所得莲藕组织总RNA完整性好、纯度高并且产率高。本发明实验过程简便,操作方便、安全,结果准确、有效,重复性好,该方法也适用于富含多糖、多酚的其它物种的植物组织总RNA的提取。

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