公开(公告)号：CN104232579B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410510022.2

申请日：2014-09-28

Applicant: 武汉大学

Inventor： 桑明 ,  霍文哲 ,  刘金彪 ,  代明 ,  周立 ,  高建峰 ,  杨四军 ,  刘航

IPC: C12N5/0786 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明涉及恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法，具体为分离外周血单个核细胞，收集的外周血单个核细胞用PBS重悬、洗涤2次，洗过的细胞经离心回收，每次1200 rpm离心8 min，最后用含2%?4%猴自体血清、1%青链霉素和1‰HEPES的RPMI 1640培养液重悬，重悬的细胞的密度在3×106个细胞/ml，立即加入到CELLBIND Surface的96孔培养板，0.8×106个细胞/孔，或48孔培养板，3×106个细胞/孔中培养，24h后将未贴壁细胞用RPMI 1640培养液洗弃，之后用含2%?4%猴自体血清的完全培养基继续培养贴壁的细胞，以后每2~3天换一次培养液，7天后观察细胞形态，判定细胞分化结果。分化培养得到的恒河猴单核巨噬细胞纯度高，具有典型巨噬细胞形态学和免疫学特性。该方法简单、经济、有效。

公开(公告)号：CN104232579A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410510022.2

申请日：2014-09-28

Applicant: 武汉大学

Inventor： 桑明 ,  霍文哲 ,  刘金彪 ,  代明 ,  周立 ,  高建峰 ,  杨四军 ,  刘航

IPC: C12N5/0786 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明涉及恒河猴外周血单核巨噬细胞的培养方法，具体为分离外周血单个核细胞，收集的外周血单个核细胞用PBS重悬、洗涤2次，洗过的细胞经离心回收，每次1200rpm离心8min，最后用含2%-4%猴自体血清、1%青链霉素和1‰HEPES的RPMI1640培养液重悬，重悬的细胞的密度在3×106个细胞/ml，立即加入到CELLBINDSurface的96孔培养板，0.8×106个细胞/孔，或48孔培养板，3×106个细胞/孔中培养，24h后将未贴壁细胞用RPMI1640培养液洗弃，之后用含2%-4%猴自体血清的完全培养基继续培养贴壁的细胞，以后每2~3天换一次培养液，7天后观察细胞形态，判定细胞分化结果。分化培养得到的恒河猴单核巨噬细胞纯度高，具有典型巨噬细胞形态学和免疫学特性。该方法简单、经济、有效。