一种去除杂交瘤细胞中细菌污染的方法

    公开(公告)号:CN116144603A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202211592286.8

    申请日:2022-12-06

    IPC分类号: C12N5/20 C07K16/10

    摘要: 本发明公开一种去除杂交瘤细胞中细菌污染的方法,其中,所述去除杂交瘤细胞中细菌污染的方法包括以下步骤:将细菌污染的杂交瘤细胞离心弃上清,加入培养基重悬,得到重悬的杂交瘤细胞;向小鼠的腹腔内注射所述重悬的杂交瘤细胞,得到实验小鼠,培养后,取出小鼠的腹腔内的液体,得第一杂交瘤细胞;将所述第一杂交瘤细胞转入无菌离心管内,离心弃上清,用培养基重悬细胞沉淀,细胞悬液铺于板孔中培养,得第二杂交瘤细胞;将第二杂交瘤细胞进行亚克隆,得亚克隆细胞;将所述亚克隆细胞扩大培养,得到净化的杂交瘤细胞。本发明提供的技术方案能够有效的净化细胞,得到特异性及纯净性良好的杂交瘤细胞。

    一种PCV2抗体效价的检测方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116449021A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202310350351.4

    申请日:2023-03-30

    IPC分类号: G01N33/68 G01N33/53

    摘要: 本发明公开了一种PCV2抗体效价的检测方法,包括以下步骤:用稀释液分别梯度稀释被检样品和参照样品,得多个稀释的被检样品和多个稀释的参照样品;再加入致敏红细胞悬液混合得多个稀释的被检样品和参照样品的凝集混合液,根据凝集混合液的致敏红细胞凝集情况确定被检样品和参照样品的效价,多次重复测定参照样品获得标定的参照样品效价;根据公式计算,被检样品的PCV2抗体效价=(被检样品效价÷参照样品效价)×标定的参照样品效价。该方法通过设置参照样品,能够获得相对准确的检测结果,解决不同批次致敏红细胞检测结果不一致的问题,由此建立的间接血凝方法检测结果稳定、准确,可用于定量PCV2抗体效价,从而评估免疫了PCV2疫苗的实验动物的免疫情况。

    一种猪肺泡巨噬细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN113583957B

    公开(公告)日:2023-04-28

    申请号:CN202110928853.1

    申请日:2021-08-13

    IPC分类号: C12N5/0786 C12N5/071

    摘要: 本发明公开了一种猪肺泡巨噬细胞的制备方法,包括:获得猪肺脏样品;获得细胞洗涤液引流装置,包括:灌胃针头、输液器和用于装细胞洗涤液的容器;所述输液器包括输液管、设置在所述输液管上的开关,分别设置在所述输液管两端的进液接头和出液接头;所述进液接头与所述容器相连通,所述出液接头与所述灌胃针头相连接;将所述灌胃针头伸入所述猪肺脏样品中的肺主气管内,以注入细胞洗涤液,待所述猪肺脏样品中整个肺脏充盈时,取出所述灌胃针头并夹紧肺主气管,获得充盈肺脏;后装进自封袋并封口置于振动器上振动以洗脱肺泡巨噬细胞获得灌洗液;离心和固液分离获得PAM沉淀,细胞培养获得猪肺泡巨噬细胞。该方法可以减少污染率,提高细胞制备量。

    猪瘟病毒E2抗原ELISA检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN115097134A

    公开(公告)日:2022-09-23

    申请号:CN202210314917.3

    申请日:2022-03-28

    摘要: 本发明公开一种猪瘟病毒E2抗原ELISA检测试剂盒及其应用,所述猪瘟病毒E2抗原ELISA检测试剂盒包括检测板、标准品以及酶标二抗,其中,所述检测板包被有抗CSFV‑E2蛋白多克隆抗体,所述标准品为CSFV‑E2蛋白标准品,所述酶标二抗为酶标记的抗CSFV‑E2蛋白单克隆抗体。本发明提供的猪瘟病毒E2抗原ELISA检测试剂盒能够检测待检样品中猪瘟病毒E2蛋白的准确含量,最低检出量为40ng/mL;大大促进了抗原生产在线监测、疫苗工艺优化、疫苗质量评估和疫苗效力检验;不仅具有ELISA检测方法敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好和适合于批量检测的优点,还克服了抗原空间构象问题所致的特异性低和二抗问题所致的灵敏度低等缺陷,显著提高了检测的特异性和灵敏度。

    副猪嗜血杆菌培养基及其制备方法

    公开(公告)号:CN114149951A

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN202111680735.X

    申请日:2021-12-30

    IPC分类号: C12N1/20 C12R1/21

    摘要: 本发明公开一种副猪嗜血杆菌培养基及其制备方法,所述副猪嗜血杆菌培养基包括以下组分:基础培养基、辅酶Ⅰ、马血清以及脱纤绵羊血。本发明通过在基础培养基中添加辅酶Ⅰ、脱纤绵羊血和马血清,解决了副猪嗜血杆菌在血琼脂培养基上生长必须接种金黄色葡萄球菌的问题,使菌落更纯粹,有效地减少了细菌纯化中杂菌污染的机率;而且,本发明培养基营养更充足,更适合副猪嗜血杆菌的生长特性,比巧克力培养基上生长更稳定、菌落更大、保存时间更长,培养的活菌在2~8℃可保30日。本发明提出的副猪嗜血杆菌培养基可以用于培养、鉴别和分离副猪嗜血杆菌,并有效地提高了对该菌的分离成功率。