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公开(公告)号：CN113061586B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202110332476.5
申请日：2021-03-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/113 , C12N15/34 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，发明的原理和最核心的关键技术是利用sgRNA，替换EGFP后进行病毒纯化，获得可以稳定扩增血清8型禽腺病的纤突蛋白的重组禽腺病毒。利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入的血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F，成功获得了表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白的重组FAdV‑4，在体外实验结果显示，FAdV4‑F1‑F‑F2重组病毒与FAdV‑4野毒的复制能力几乎相同，可作为防控FAdV‑4和FAdV‑8的灭活重组多价苗。
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公开(公告)号：CN116474085A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310490815.1
申请日：2023-05-04
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/235 , C12N15/861 , C12N15/34 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种重组禽腺病毒二价灭活疫苗，疫苗是灭活的表达血清8b型禽腺病毒纤突蛋白的重组血清4型禽腺病毒FA4‑F。表达血清8b型禽腺病毒纤突蛋白的重组血清4型禽腺病毒FA4‑F的构建方法，在表达EGFP的重组血清4禽腺病毒的F1和F2基因之间插入血清8b型禽腺病毒纤突基因。一种重组禽腺病毒二价灭活疫苗，灭活是将细胞培养的FA4‑F的重组病毒液加入0.1％v/v的甲醛37℃作用24h进行灭活；甲醛灭活病毒液与油佐剂按1:3(v/v)的比例乳化用于制备油佐剂灭活疫苗。通过本发明，针对目前国内鸡群中正流行爆发的由FAdV‑4和FAdV‑8感染引起的HHS和IBH，为防控FAdV‑4和FAdV‑8b的感染提供了候选疫苗株；因此，本发明具有一定的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN116376979A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310353553.4
申请日：2023-04-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9编辑技术的敲除鸡柯萨奇腺病毒受体CAR基因的细胞系的构建方法，包括以下步骤：步骤1)、设计一种特异性靶向鸡CAR基因的sgRNA；步骤2)、构建一种用于靶向敲除鸡CAR基因的CRISPR‑Cas9系统，CRISPR‑Cas9系统中含有Cas9蛋白和上述特异性靶向鸡CAR基因的sgRNA，或者含有携带编码Cas9蛋白的编码序列和编码sgRNA的编码序列；CRISPR‑Cas9系统中，Cas9蛋白基因和sgRNA序列位于同一载体上，所述载体为lentiCRISPR v2；步骤3)、将lentiCRISPR v2质粒转染到细胞中，利用CRISPR‑Cas9系统编辑实现CAR基因沉默，通过药物筛选杀死阴性细胞，随后通过亚克隆的方法获得单克隆细胞株，从而获得鸡源CAR敲除的细胞系。本发明为探究CAR生物学功能与解析CAR基因在FAdV‑8b的感染中的作用打下了基础，具有较大的应用研究价值。
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公开(公告)号：CN113061586A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110332476.5
申请日：2021-03-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/113 , C12N15/34 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，发明的原理和最核心的关键技术是利用sgRNA，替换EGFP后进行病毒纯化，获得可以稳定扩增血清8型禽腺病的纤突蛋白的重组禽腺病毒。利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入的血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F，成功获得了表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白的重组FAdV‑4，在体外实验结果显示，FAdV4‑F1‑F‑F2重组病毒与FAdV‑4野毒的复制能力几乎相同，可作为防控FAdV‑4和FAdV‑8的灭活重组多价苗。
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