公开(公告)号：CN109022484A

公开(公告)日：2018-12-18

申请号：CN201810889239.7

申请日：2018-08-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张亚妮 ,  张文慧 ,  李碧春 ,  王颖洁 ,  王曼 ,  程少泽 ,  汪怡临 ,  何娜娜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  G01N33/569

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  C12N15/902 ,  G01N33/56966

Abstract: 本发明属于动物育种学和细胞生物学领域，具体涉及一种Nanos2在鸡ESCs向雄性生殖细胞分化过程中功能验证的方法，包括Nanos2在鸡不同组织中的表达量检测、Nanos2克隆与pcDNA3.0‑Nanos2载体的构建、Nanos2敲除载体构建及敲除活性验证、体外Nanos2功能验证、体内Nanos2功能验证、Quantitative Real Time PCR(quantitative RT‑PCR)验证、细胞形态学观察及细胞免疫化学检测、流式细胞分析、石蜡切片及PAS染色。相对于现有技术，能够较快地在鸡生殖细胞水平完成Nanos2的功能验证。方法简单易行，可重复性强，在普通实验室即可进行。该方法大大提高了体外诱导鸡ESCs向雄性生殖细胞分化的效率。该方法大大提高了体内诱导鸡PGCs和SSCs的生成效率。

公开(公告)号：CN108949921A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810916667.4

申请日：2018-08-13

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张亚妮 ,  王颖洁 ,  李碧春 ,  张文慧 ,  王曼 ,  程少泽 ,  汪怡临 ,  何娜娜

IPC: C12Q1/6851 ,  G01N33/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  C12Q2521/107 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明属于动物育种学和细胞生物学领域，涉及一种研究Stra8基因在如皋黄鸡生精过程中功能的方法，包括如下步骤：Stra8基因3’UTR序列的获得；Stra8基因靶向miRNA预测；最佳miRNA筛选；验证miRNA通过stra8对精原干细胞减数分裂的作用；体内验证miRNA对公鸡生精的影响。相对于现有技术，本发明本方法简单易行，可重复性强，在普通实验室即可进行。运用该方法可以快速、高效在短时间内验证Stra8基因在鸡减数分裂过程中的调控作用。并且能够很好的对Stra8基因进行抑制，以便更好在SSC中进行基因功能验证。