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公开(公告)号:CN109266623B
公开(公告)日:2021-01-12
申请号:CN201811168804.7
申请日:2018-10-08
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一株疫苗株rSHA‑△200及其构建方法和应用,涉及流感疫苗领域。所述疫苗株rSHA‑△200包括不含有NRT糖基化位点的HA基因。本发明通过分析,找出其HA蛋白上潜在的糖基化位点,并通过定点突变技术缺失糖基化位点,构建多个糖基化位点缺失的HA表达质粒,利用8质粒反向遗传技术获得重组疫苗株,并制备抗血清,通过对比发现:本发明得到的rSHA‑△200具有良好的交叉免疫能力和血清交叉中和能力,是一种理想的H9亚型AIV灭活疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN108315447A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810124793.6
申请日:2018-02-07
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明涉及产肠毒素大肠杆菌I型菌毛基因的应用。本发明公开了fimA序列中第71位的一段特有基序AAACTA作为监测、鉴别产肠毒素大肠杆菌的分子标记的应用。并设计一对特异性鉴定引物,可以在猪场临床环境中快速检测产肠毒素大肠杆菌。通过这对引物对分离的细菌DNA模板进行PCR扩增,如果存在产肠毒素大肠杆菌,则可以扩增预期的阳性条带;如果是其他非产肠毒素大肠杆菌病原菌,非致病大肠杆菌或引起腹泻的其他病原菌如沙门菌、魏氏梭菌等其他菌属,则结果阴性。本发明基于不同菌属I型菌毛FimA基因序列的差异性,发现在产肠毒素大肠杆菌fimA存在的特有的一段序列,设计出为临床快速区分和鉴定产肠毒素大肠杆菌提供新策略和方法。
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公开(公告)号:CN106442988A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201610877089.9
申请日:2016-10-08
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
IPC: G01N33/573 , G01N33/569 , A61K45/00 , A61P31/04
CPC classification number: G01N33/573 , A61K45/00 , G01N33/56916 , G01N2333/948 , G01N2500/02
Abstract: 本发明属于分子生物学技术和兽医学技术领域。具体涉及产肠毒素大肠杆菌ETEC F4菌毛直接受体蛋白猪氨肽酶N功能结合域,本发明提供能够识别ETEC F4三种血清型主要功能性亚基FaeG的宿主受体蛋白结合结构域的氨基酸序列。本发明确定了APN与FaeG蛋白互作的功能结合域,为进一步探讨APN的作用机理和F4三种血清型的不同致病机制奠定了基础。
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公开(公告)号:CN108384865A
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201810123080.8
申请日:2018-02-07
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明涉及Alpha菌毛基因在仔猪腹泻致病性大肠杆菌监测、鉴别中的应用。本发明还提供一对用于检测仔猪腹泻致病性大肠杆菌的特异性引物和试剂盒。鉴定引物用于猪场临床环境中致仔猪腹泻大肠杆菌的快速检测;对从饲料、饮水(或污水)、扬尘和粪便中分离细菌为模板,利用这对引物进行PCR扩增,如果是致仔猪腹泻致病性大肠杆菌,则PCR扩增为预期阳性;如果是其他非致病大肠杆菌,如沙门菌、魏氏梭菌等其他菌属,则结果为阴性。本发明基于不同菌属或者不同表型大肠杆菌中Alpha菌毛基因的分布差异,以及Alpha菌毛cblB基因序列保守性的特点,为临床快速区分和鉴定致仔猪腹泻大肠杆菌提供新的方法和选择。
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公开(公告)号:CN106442988B
公开(公告)日:2018-03-20
申请号:CN201610877089.9
申请日:2016-10-08
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
IPC: C07K14/47 , G01N33/573 , G01N33/569 , A61K45/00 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于分子生物学技术和兽医学技术领域。具体涉及产肠毒素大肠杆菌ETEC F4菌毛直接受体蛋白猪氨肽酶N功能结合域,本发明提供能够识别ETEC F4三种血清型主要功能性亚基FaeG的宿主受体蛋白结合结构域的氨基酸序列。本发明确定了APN与FaeG蛋白互作的功能结合域,为进一步探讨APN的作用机理和F4三种血清型的不同致病机制奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109295011B
公开(公告)日:2020-06-19
申请号:CN201811252814.9
申请日:2018-10-25
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
Abstract: 本发明提供了一株疫苗株rSN‑R92G‑E93K,属于流感疫苗制备技术领域,将HA基因片段制备成表达载体pHW‑SN‑HA,再对表达载体进行点突变,将得到的表达质粒SNHA‑R92G‑E93K再与含有其它基因质粒共转染细胞、重组后得到。本发明提供的疫苗株rSN‑R92G‑E93K的HI效价为11.6±0.5log2,血清中和效价为296.50±103.95log2,由此能够得出疫苗株rSN‑R92G‑E93K是一株比较理想的疫苗株。
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公开(公告)号:CN109266623A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201811168804.7
申请日:2018-10-08
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一株疫苗株rSHA-△200及其构建方法和应用,涉及流感疫苗领域。所述疫苗株rSHA-△200包括不含有NRT糖基化位点的HA基因。本发明通过分析,找出其HA蛋白上潜在的糖基化位点,并通过定点突变技术缺失糖基化位点,构建多个糖基化位点缺失的HA表达质粒,利用8质粒反向遗传技术获得重组疫苗株,并制备抗血清,通过对比发现:本发明得到的rSHA-△200具有良好的交叉免疫能力和血清交叉中和能力,是一种理想的H9亚型AIV灭活疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN109295011A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811252814.9
申请日:2018-10-25
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
Abstract: 本发明提供了一株疫苗株rSN-R92G-E93K,属于流感疫苗制备技术领域,将HA基因片段制备成表达载体pHW-SN-HA,再对表达载体进行点突变,将得到的表达质粒SNHA-R92G-E93K再与含有其它基因质粒共转染细胞、重组后得到。本发明提供的疫苗株rSN-R92G-E93K的HI效价为11.6±0.5log2,血清中和效价为296.50±103.95log2,由此能够得出疫苗株rSN-R92G-E93K是一株比较理想的疫苗株。
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公开(公告)号:CN106318913A
公开(公告)日:2017-01-11
申请号:CN201610821360.7
申请日:2016-09-13
Applicant: 国药集团扬州威克生物工程有限公司 , 扬州大学 , 福建圣维生物科技有限公司
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2710/10051
Abstract: 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法。具体过程为:将经PCR鉴定为血清4型禽腺病毒的病毒接种于鸡肝细胞,通过细胞悬浮培养技术高效扩增血清4型禽腺病毒。本发明本发明利用鸡肝细胞,建立的血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法,能实现对血清4型禽腺病毒高效扩增,与鸡胚接种比较,病毒滴度比鸡胚接种培养病毒高100倍以上(传统鸡胚毒效价小于106.0TCID50/ml)。这一血清4型禽腺病毒悬浮培养扩增方法为研制血清4型禽腺病毒疫苗提供了技术,具有很好的应用价值。
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