仔猪副伤寒弱毒菌发酵培养物、活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN114134097A

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN202111494811.8

    申请日:2021-12-09

    摘要: 本发明公开一种仔猪副伤寒弱毒菌的发酵培养物、活疫苗及其制备方法,发酵培养物的制备方法包括如下步骤:一级种子的培养:将仔猪副伤寒弱毒菌接种于血平板上,在36~37℃下厌氧培养18~22h;二级种子的培养:从生长有仔猪副伤寒弱毒菌一级种子的血平板上,挑选出圆形、细小、半透明、光滑、湿润、圆整的单菌落,将其接种于培养基中,在36~37℃下培养18~22h,得到生长有仔猪副伤寒弱毒菌二级种子的培养液;发酵培养:在发酵罐中依次加入培养基和消泡剂,高压高温灭菌后降温,再将步骤S12制备的培养液接种到发酵罐内,培养即得。本发明发酵培养物活菌数可达到400‑450CFU/ml(×108),冻干成活率达70%以上,制品安全性更可靠,具有极好的产业应用价值。

    基于重组荧光病毒的血清4型禽腺病毒中和抗体的检测方法

    公开(公告)号:CN113917139A

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN202111207886.3

    申请日:2021-10-18

    摘要: 本发明公开了一种基于重组荧光病毒的血清4型禽腺病毒中和抗体的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将待检血清稀释后与10000~20000TCID50/50μL的荧光病毒FAdV‑4‑EGFP混合,恒温孵育1~2h;S2、将孵育好的病毒与血清的混合物接种于LMH细胞中并培养24~36h,然后在荧光显微镜下观察荧光病毒被中和情况。本发明以前期拯救的表达绿色荧光蛋白的重组病毒FAdV‑4‑EGFP为基础,该毒株为高度致弱疫苗候选株,高剂量肌注感染鸡也不发病,与亲本株生长特性相近、生物安全性高、不存在散播强毒的隐患;相比于传统的中和试验,本发明提供的方案最短仅需要感染重组病毒24h后即可观察结果,可实现中和试验结果提前2‑3天,大幅缩短了检测所需时间。