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公开(公告)号：CN109504643A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201811422062.6
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT-X::PtetF18重组质粒的构建；通过整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的四拷贝F18菌毛基因整合克隆株且表达展示在细胞表面。相对于现有技术，本发明的有益效果为：去除Nissle1917益生菌原有质粒，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞（IPEC-1）的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F18菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠血清能显著减低F18+菌株对猪肠道传代细胞系IPEC-J2的粘附。
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公开(公告)号：CN109628361B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN201811437985.9
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因猪源益生菌EP1克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT‑maeB::PtetF4和pTargetT‑nth/tppB::PtetF4重组质粒的构建；通过整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的双拷贝F4菌毛基因整合克隆株。该益生菌克隆株作为益生菌活疫苗候选株和仔猪断奶后腹泻和水肿病的治疗用药物。相对于现有技术，本发明的有益效果为：猪源益生菌NY10(EP1)，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；体外细胞感染抑制实验表明，预孵育重组菌和IPEC‑J2细胞可竞争抑制F4菌毛阳性大肠杆菌病原3030‑2对IPEC‑J2细胞的感染并显著降低其黏附数量。
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公开(公告)号：CN109468256A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811422515.5
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合四拷贝F18菌毛操纵子基因和双拷贝F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法，包括如下步骤：pTargetT-X::PtetF18和pTargetT-X::PtetF4重组质粒的构建；通过整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因和双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的四拷贝F18菌毛基因和双拷贝F4菌毛基因复合整合克隆株。本发明的有益效果为：该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F18菌毛和抗F4菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠的血清能显著减低F18+和F4+菌株对猪肠道传代细胞系IPEC-J2的粘附。
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公开(公告)号：CN109468256B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201811422515.5
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合四拷贝F18菌毛操纵子基因和双拷贝F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法，包括如下步骤：pTargetT‑X::PtetF18和pTargetT‑X::PtetF4重组质粒的构建；通过整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因和双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的四拷贝F18菌毛基因和双拷贝F4菌毛基因复合整合克隆株。本发明的有益效果为：该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F18菌毛和抗F4菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠的血清能显著减低F18+和F4+菌株对猪肠道传代细胞系IPEC‑J2的粘附。
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公开(公告)号：CN109468255A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811421935.1
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合单拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT-nth/tppB::PtetF4重组质粒的构建；通过整合单拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的单拷贝F4菌毛基因整合克隆株。该益生菌克隆株作为益生菌活疫苗候选株和仔猪断奶后腹泻和水肿病的治疗用药物。相对于现有技术，本发明的有益效果为：去除Nissle1917益生菌原有质粒，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F4菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠的血清能显著减低F4+菌株对猪肠道传代细胞系的粘附。
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公开(公告)号：CN109504643B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201811422062.6
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT‑X::PtetF18重组质粒的构建；通过整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的四拷贝F18菌毛基因整合克隆株且表达展示在细胞表面。相对于现有技术，本发明的有益效果为：去除Nissle1917益生菌原有质粒，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞（IPEC‑1）的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F18菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠血清能显著减低F18+菌株对猪肠道传代细胞系IPEC‑J2的粘附。
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公开(公告)号：CN109468255B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201811421935.1
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合单拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT‑nth/tppB::PtetF4重组质粒的构建；通过整合单拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的单拷贝F4菌毛基因整合克隆株。该益生菌克隆株作为益生菌活疫苗候选株和仔猪断奶后腹泻和水肿病的治疗用药物。相对于现有技术，本发明的有益效果为：去除Nissle1917益生菌原有质粒，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F4菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠的血清能显著减低F4+菌株对猪肠道传代细胞系的粘附。
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公开(公告)号：CN109628361A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811437985.9
申请日：2018-11-27
申请人： 扬州大学
CPC分类号： C12N15/902 , A61K2035/115 , A61P1/12 , A61P7/10 , C07K14/245
摘要： 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因猪源益生菌EP1克隆株、构建方法及应用，包括如下步骤：pTargetT‑maeB::PtetF4和pTargetT‑nth/tppB::PtetF4重组质粒的构建；通过整合双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的双拷贝F4菌毛基因整合克隆株。该益生菌克隆株作为益生菌活疫苗候选株和仔猪断奶后腹泻和水肿病的治疗用药物。相对于现有技术，本发明的有益效果为：猪源益生菌NY10(EP1)，无抗性基因的存在；该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；体外细胞感染抑制实验表明，预孵育重组菌和IPEC‑J2细胞可竞争抑制F4菌毛阳性大肠杆菌病原3030‑2对IPEC‑J2细胞的感染并显著降低其黏附数量。
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