一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法

    公开(公告)号:CN113930487B

    公开(公告)日:2023-03-17

    申请号:CN202110642369.2

    申请日:2021-06-09

    Abstract: 本发明提供了一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法,包括以下步骤:S1、提取样本基因组DNA或游离DNA,对提取的DNA使用重亚硫酸盐进行处理,然后使用特异性引物对处理好的DNA进行依赖甲基化多重PCR扩增;S2、多重PCR产物处理和纯化:对步骤S1获得的多重PCR产物用酶或磁珠进行处理,然后纯化;S3、对步骤S2获得的纯化产物的甲基化水平进行检测。上述检测方法可以同时对多样本多基因的DNA甲基化进行检测,对起始DNA量要求低,非常适用于低拷贝数的甲基化片段检测,具有灵敏度高、特异性好、准确度高、检测限低以及检测成本低等优点,且整个检测流程和后续的数据分析步骤更简单更科学。

    用于检测肺结节良恶性的甲基化分子标记物或其组合和应用

    公开(公告)号:CN113637745B

    公开(公告)日:2022-12-06

    申请号:CN202010345338.6

    申请日:2020-04-27

    Abstract: 本发明提供了用于检测肺结节良恶性的DNA甲基化分子标记物,所述DNA甲基化分子标记物为选自SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.21所示序列或其全长的至少55%的连续片段中的任意一种或两种以上的组合;或为选自SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.21所示序列的完全互补序列或其全长的至少55%的连续片段中的任意一种或两种以上的组合。其中特别是其中的SEQ ID NO.8具有对肺结节良恶性检测的较高特异性。本发明还提供了上述DNA甲基化分子标记物的检测试剂盒和检测方法。所述DNA甲基化分子标记物与肺癌高度相关,尤其是组合使用,可以进一步提高对肺结节良恶性的检测的灵敏度和特异性,提高恶性肺结节的检出率,降低检出的假阳性率。所述试剂盒中的引物和探针克服了多个引物和探针在进行多重PCR扩增和检测时存在相互干扰的缺点,定量性能与单个区域定量等同。

    一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法

    公开(公告)号:CN113930487A

    公开(公告)日:2022-01-14

    申请号:CN202110642369.2

    申请日:2021-06-09

    Abstract: 本发明提供了一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法,包括以下步骤:S1、提取样本基因组DNA或游离DNA,对提取的DNA使用重亚硫酸盐进行处理,然后使用特异性引物对处理好的DNA进行依赖甲基化多重PCR扩增;S2、多重PCR产物处理和纯化:对步骤S1获得的多重PCR产物用酶或磁珠进行处理,然后纯化;S3、对步骤S2获得的纯化产物的甲基化水平进行检测。上述检测方法可以同时对多样本多基因的DNA甲基化进行检测,对起始DNA量要求低,非常适用于低拷贝数的甲基化片段检测,具有灵敏度高、特异性好、准确度高、检测限低以及检测成本低等优点,且整个检测流程和后续的数据分析步骤更简单更科学。

    人血液中结直肠癌诊断相关的甲基化生物标记物及其应用

    公开(公告)号:CN110724743A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201911119701.6

    申请日:2019-11-15

    Abstract: 本发明公开了与结直肠癌相关的甲基化生物标记物及其应用,所述与结直肠癌相关的甲基化生物标记物是cg21644830、cg11407741、cg12619536、cg04156369、cg15248577、cg16903605、cg00397851、cg01922936、cg17849956、cg15717808、cg18323466、cg15177071、cg19918758、cg26337020、cg01333350、cg07344025、cg03786924、cg04380513、和cg12665504的组合。本发明所筛选的19种生物标记物的组合与血液中与结直肠癌诊断高端相关,特别是所选择的生物标记物的组合,对于早期的结直肠癌样本的针对性很强,利用这些生物标记物以及相应的检测技术开展结直肠癌的无创早筛早诊意义重大。

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