公开(公告)号：CN108728518A

公开(公告)日：2018-11-02

申请号：CN201710210298.2

申请日：2017-03-31

Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)

Inventor： 刘倩 ,  张琳 ,  高秋芳 ,  李家玉

IPC: C12Q1/6851

Abstract: 本发明公开了一种实时荧光定量PCR探针检测法及其反应液和试剂盒。该反应液包括PCR缓冲液、Taq热启动酶、dNTP、终浓度为0.04～0.05M的甜菜碱、终浓度不超过0.05M的海藻糖及终浓度为30～40mM的四甲基氯化铵，该反应液中还进一步添加有氯化镁，至氯化镁的终浓度为3.0～5.0mM。通过在反应液中加入特定浓度的甜菜碱和海藻糖，可以在高温下保护Taq热启动酶的正常活性，加入特定浓度的四甲基氯化铵，可以提高PCR反应的特异性，并且进一步提高了反应液中氯化镁的浓度，在保证并不影响扩增特异性的同时，显著提高了扩增的产量和效率，能够有效缩短扩增所需要的时间。

公开(公告)号：CN108753941B

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN201810650311.0

申请日：2018-06-22

Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)

Inventor： 柯长洪 ,  温华杰 ,  李家玉 ,  古晓奎 ,  王哲 ,  高秋芳 ,  雷志斌

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6804

Abstract: 本发明涉及一种双重标记磁珠及其制备方法和应用。该双重标记磁珠在醛基葡聚糖包被的纳米氧化铁磁珠表面固定有捕获抗体和固定寡核苷酸片段，在检测时，当捕获抗体捕获有目标微生物时，可以产生第一重信号。该第一重信号的有无可以反映出磁珠通过特异性的捕获抗体有无捕获到微生物。后续进一步可以通过特异性设计的第二扩增引物对对捕获的微生物的特异性核酸区域进行扩增，并借助第二荧光检测探针检测得到第二重信号，该第二重信号的有无即可反映由捕获抗体捕获的微生物是否是目的微生物。通过双重信号进行微生物检测，检测结果的准确性和可靠性显著提高，并且在检测时，首先经由捕获抗体捕获和富集目的微生物，因而检测灵敏度也显著提高。

公开(公告)号：CN108753941A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810650311.0

申请日：2018-06-22

Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)

Inventor： 柯长洪 ,  温华杰 ,  李家玉 ,  古晓奎 ,  王哲 ,  高秋芳 ,  雷志斌

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6804

CPC classification number: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2563/143 ,  C12Q2563/149 ,  C12Q2563/137

Abstract: 本发明涉及一种双重标记磁珠及其制备方法和应用。该双重标记磁珠在醛基葡聚糖包被的纳米氧化铁磁珠表面固定有捕获抗体和固定寡核苷酸片段，在检测时，当捕获抗体捕获有目标微生物时，可以产生第一重信号。该第一重信号的有无可以反映出磁珠通过特异性的捕获抗体有无捕获到微生物。后续进一步可以通过特异性设计的第二扩增引物对对捕获的微生物的特异性核酸区域进行扩增，并借助第二荧光检测探针检测得到第二重信号，该第二重信号的有无即可反映由捕获抗体捕获的微生物是否是目的微生物。通过双重信号进行微生物检测，检测结果的准确性和可靠性显著提高，并且在检测时，首先经由捕获抗体捕获和富集目的微生物，因而检测灵敏度也显著提高。