实时荧光定量PCR探针检测法及其反应液和试剂盒

    公开(公告)号:CN108728518A

    公开(公告)日:2018-11-02

    申请号:CN201710210298.2

    申请日:2017-03-31

    Abstract: 本发明公开了一种实时荧光定量PCR探针检测法及其反应液和试剂盒。该反应液包括PCR缓冲液、Taq热启动酶、dNTP、终浓度为0.04~0.05M的甜菜碱、终浓度不超过0.05M的海藻糖及终浓度为30~40mM的四甲基氯化铵,该反应液中还进一步添加有氯化镁,至氯化镁的终浓度为3.0~5.0mM。通过在反应液中加入特定浓度的甜菜碱和海藻糖,可以在高温下保护Taq热启动酶的正常活性,加入特定浓度的四甲基氯化铵,可以提高PCR反应的特异性,并且进一步提高了反应液中氯化镁的浓度,在保证并不影响扩增特异性的同时,显著提高了扩增的产量和效率,能够有效缩短扩增所需要的时间。

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