一种深海真菌新型乙酰转移酶GliK及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN112852775B

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202011580982.8

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明公开了一种深海真菌新型乙酰转移酶GliK及其编码基因和应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示将乙酰转移酶GliK的编码基因克隆入大肠杆菌表达载体,导入宿主细胞,获得重组表达的乙酰转移酶GliK,通过诱导表达得到深海真菌FS140新型乙酰转移酶GliK纯化蛋白,对其进行酶学性质测定结果表明新型乙酰转移酶GliK最适反应温度为35℃,最适PH值为7,热稳定性较好,该酶反应动力学参数Km和Vmax的值分别为302.8μM和4092U/mg。通过对GliK的酶学性质分析测定发现来源于深海真菌G.pallida FS140的GliK基因极有可能是一种新型的乙酰转移酶,在胶霉毒素酰基化过程中发挥关键作用。这为后期通过转录调控和异源表达以提升乙酰胶霉毒素的表达水平并获得新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。

    一种深海真菌新型乙酰转移酶GliK及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN112852775A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202011580982.8

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明公开了一种深海真菌新型乙酰转移酶GliK及其编码基因和应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示将乙酰转移酶GliK的编码基因克隆入大肠杆菌表达载体,导入宿主细胞,获得重组表达的乙酰转移酶GliK,通过诱导表达得到深海真菌FS140新型乙酰转移酶GliK纯化蛋白,对其进行酶学性质测定结果表明新型乙酰转移酶GliK最适反应温度为35℃,最适PH值为7,热稳定性较好,该酶反应动力学参数Km和Vmax的值分别为302.8μM和4092U/mg。通过对GliK的酶学性质分析测定发现来源于深海真菌G.pallida FS140的GliK基因极有可能是一种新型的乙酰转移酶,在胶霉毒素酰基化过程中发挥关键作用。这为后期通过转录调控和异源表达以提升乙酰胶霉毒素的表达水平并获得新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。

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