-
公开(公告)号：CN114457057B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202210242255.3
申请日：2022-03-11
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶突变体及其应用，所述壳聚糖酶突变体为糖苷水解酶壳聚糖酶氨基酸序列第154位点上的甘氨酸突变为缬氨酸，通过分析糖苷水解酶壳聚糖酶结构上的高去折叠自由能位点，以此选择突变位点进行饱和突变，筛选出温度稳定性提高的壳聚糖酶突变体，并在大肠杆菌中表达，制备的壳聚糖酶突变体温度稳定性显著提升，且在提高温度稳定性的同时对壳聚糖酶突变体的其他特性无影响，工业化生产具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN113913483A
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202111396452.2
申请日：2021-11-23
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种海藻糖和葡萄糖酸联产的方法。利用安全菌株谷氨酸棒杆菌过量表达海藻糖合酶并利用曲拉通X‑100处理重组谷氨酸棒杆菌获得透性化细胞，可使用全细胞催化麦芽糖合成海藻糖。在催化制备海藻糖的反应液中添加产葡萄糖酸黑曲霉AnM1菌体，将体系中的葡萄糖氧化成葡萄糖酸，可降低葡萄糖对海藻糖合酶活性的抑制作用，提高海藻糖合成速率。待海藻糖合成反应平衡，反应液离心收集谷氨酸棒杆菌和黑曲霉菌体，所得菌体可重复利用。所得反应液上清中添加糖化酶和黑曲霉AnM1菌体，将反应液中剩余麦芽糖水解成葡萄糖并氧化成葡萄糖酸，获得含海藻糖和葡萄糖酸的反应液。本发明可同时生产海藻糖和葡萄糖酸，并能提高原料利用率。
-
公开(公告)号：CN119410614A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411582568.9
申请日：2024-11-07
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明涉及产壳四糖的壳聚糖酶突变体及其应用，属于酶工程领域。具体的：所述壳聚糖酶来源于枯草芽孢杆菌的GH46家族糖苷水解酶（BsCsn46A），壳聚糖酶突变体为BsCsn46A氨基酸序列的第151位天冬氨酸突变为丝氨酸，突变体为D151S；或突变为苏氨酸，突变体为D151T；或突变为络氨酸，突变体为D151Y。突变体具有水解壳聚糖产壳四糖的能力。
-
公开(公告)号：CN116676297A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310730902.X
申请日：2023-06-20
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，公开了单产壳二糖的壳聚糖酶突变体。对来源于枯草芽孢杆菌中克隆的新的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶（BsCsn46A），氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示进行定点突变，壳聚糖酶的突变体为G21W、E235R、Y236K，通过水解反应分析，发现与原始酶水解壳聚糖的产物为壳二糖（COS2）和壳三糖（COS3）不同的是，本发明的突变体壳聚糖酶的水解产物主要为COS2。
-
公开(公告)号：CN113755471B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202111004819.1
申请日：2021-08-30
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的壳聚糖酶第121位脯氨酸突变为天冬酰胺或半胱氨酸或缬氨酸。本发明壳聚糖酶突变体与野生型壳聚糖酶相比，三种突变体催化胶体壳聚糖获得壳寡糖的比酶活分别提高1.69、1.97及2.15倍，特别是P121N突变体，提高催化活性的同时，没有损失热稳定性，具备良好的应用前景；本发明还提供一种上述突变体的构建方法，通过分析该酶蛋白结构上的高去折叠自由能位点，以此选取突变位点，采用基因工程方法对该位点进行饱和突变，然后筛选目的蛋白。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111602732A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010458727.X
申请日：2020-05-27
Applicant: 常州大学
IPC: A23F3/34
Abstract: 本发明公开了一种荷叶茶制作方法包括以下步骤：对未经加工的荷叶进行预处理；将经过预处理的荷叶进行杀青处理，所述杀青处理条件为190～210 oC温度下烘烤60～120秒；对杀青处理后的荷叶进行干燥处理，所述干燥处理条件为100～120 oC温度下烘烤3～6分钟；对干燥处理后的荷叶进行提香，所述提香条件为190～210 oC温度下烘烤30～60秒。本发明可提升荷叶茶的品质与口感。
-
公开(公告)号：CN119464257A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411582567.4
申请日：2024-11-07
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖酶突变体及其在制备壳四糖中的应用，属于酶工程领域。本发明通过对枯草芽孢杆菌壳聚糖酶BsCsn46A氨基酸序列（SEQ ID NO:1）第149位进行定点饱和突变筛选出水解产物具有壳四糖潜力的突变体，将天冬氨酸突变为甘氨酸，标记为D149G，突变体水解产物除了壳二糖，壳三糖，还有壳四糖。
-
公开(公告)号：CN114752584B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202210409302.9
申请日：2022-04-19
Applicant: 常州大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/00 , C12P19/02 , C12P19/04 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因克隆，定点突变，基因重组技术，具体公开了从阿维链霉菌中克隆的新的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶(SaCsn46A)的突变体，该酶由271个氨基酸组成，其中包含34个氨基酸信号肽。通过分析该酶蛋白结构上的高去折叠自由能位点，以此选择突变位点进行突变，筛选出温度稳定性提高的壳聚糖酶突变体。本发明将原始酶SaCsn46A第237位甘氨酸突变为丙氨酸(G237A)，将突变体在大肠杆菌Rosetta中进行表达。通过与野生型壳聚糖酶比较，发现突变酶的温度稳定性相比于野生菌型的温度稳定性提高了4.8倍。薄层色谱分析结果表明，该酶水解产物主要为氨基葡萄糖GlcN和(GlcN)2。
-
公开(公告)号：CN114736889B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202210377637.7
申请日：2022-04-12
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明涉及基因克隆，定点突变，基因重组技术，具体提供一种N端突变酶稳定性提升的壳聚糖酶突变体及其应用，属于酶工程领域。本发明将SaCsn46A的N端第2位脯氨酸突变为甘氨酸(P2G)，突变体在大肠杆菌Rosetta中进行表达。通过与野生型壳聚糖酶比较，发现突变酶在50℃的温度稳定性相比于野生菌型的温度稳定性提高了1.53倍。薄层色谱分析结果表明，该酶水解产物主要为氨基葡萄糖GlcN和(GlcN)2，说明突变体壳聚糖酶在温和条件下工业化生产GlcN和(GlcN)2方面具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN116590260A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310730901.5
申请日：2023-06-20
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，具体涉及一种产壳四糖的壳聚糖酶突变体。所述壳聚糖酶来源于枯草芽孢杆菌的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶（BsCsn46A），以氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的壳聚糖酶BsCsn46A为出发酶，通过计算机辅助模拟分析壳聚糖酶底物通道，同时将BsCsn46A与底物进行分子对接，确定可能会对壳聚糖酶水解产物聚合度有影响的氨基酸位点，对这些氨基酸位点进行定点突变，分别突变成酸性氨基酸E（谷氨酸）及碱性氨基酸K（赖氨酸）。本发明获得两种壳聚糖酶突变体T50E和E203K，与原始酶相比，突变体酶水解壳聚糖除产生COS2和COS3外，还有壳四糖（COS4）生成。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
25
records
(took 0.015 seconds)
