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公开(公告)号:CN119410615A
公开(公告)日:2025-02-11
申请号:CN202411582571.0
申请日:2024-11-07
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,公开了一种具有产壳四糖能力的壳聚糖酶突变体及其应用。将来源于枯草芽孢杆菌的GH46家族糖苷水解酶壳聚糖酶(BsCsn46A),氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,对BsCsn46A第203位氨基酸残基进行饱和突变筛选出具有产壳四糖潜力的突变体,获得的壳聚糖酶突变体为E203M,E203S,E203R,E203H,E203N,E203C,E203Q,E203G,E203T,E203V,E203P。通过水解结果分析,获得的突变体具有产壳四糖的能力。
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公开(公告)号:CN116949015A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310871726.1
申请日:2023-07-17
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种酶催化活性提高的壳聚糖酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。所述壳聚糖酶来源于枯草芽孢杆菌的46家族糖苷水解酶(BsCsn46A),所述壳聚糖酶突变体为BsCsn46A氨基酸序列第203位谷氨酸突变成小体积侧链氨基酸丙氨酸,所述突变体为E203A,该突变体以壳聚糖为底物,催化活性比野生型显著提高。
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公开(公告)号:CN116855478A
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202310856865.7
申请日:2023-07-13
Applicant: 常州大学
IPC: C12N9/24 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/14 , C12P19/00 , C12P19/12 , C12P19/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种改变底物通道酸碱性的催化活性提高的壳聚糖酶突变体。基于底物通道调控的枯草芽孢杆菌壳聚糖酶BsCsn46A,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的壳聚糖酶的第49位丙氨酸突变为碱性氨基酸赖氨酸,所述突变体为A49K。本发明的壳聚糖酶突变体与野生型壳聚糖酶相比,该突变体以壳聚糖为底物,催化活性比野生型提高了1.13倍。
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公开(公告)号:CN116656654A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310718012.7
申请日:2023-06-16
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种改变产物聚合度的壳聚糖酶突变体及其应用。将来源于枯草芽孢杆菌的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶(BsCsn46A),氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,第50位苏氨酸突变成大体积疏水侧链氨基酸W或小体积侧链氨基酸A;突变体分别为T50A、T50W。与原始酶相比,壳聚糖酶突变体酶水解壳聚糖除产生COS2和COS3外,还有壳四糖(COS4)生成。
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公开(公告)号:CN113913483B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202111396452.2
申请日:2021-11-23
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明公开了一种海藻糖和葡萄糖酸联产的方法。利用安全菌株谷氨酸棒杆菌过量表达海藻糖合酶并利用曲拉通X‑100处理重组谷氨酸棒杆菌获得透性化细胞,可使用全细胞催化麦芽糖合成海藻糖。在催化制备海藻糖的反应液中添加产葡萄糖酸黑曲霉AnM1菌体,将体系中的葡萄糖氧化成葡萄糖酸,可降低葡萄糖对海藻糖合酶活性的抑制作用,提高海藻糖合成速率。待海藻糖合成反应平衡,反应液离心收集谷氨酸棒杆菌和黑曲霉菌体,所得菌体可重复利用。所得反应液上清中添加糖化酶和黑曲霉AnM1菌体,将反应液中剩余麦芽糖水解成葡萄糖并氧化成葡萄糖酸,获得含海藻糖和葡萄糖酸的反应液。本发明可同时生产海藻糖和葡萄糖酸,并能提高原料利用率。
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公开(公告)号:CN115873274A
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN202211353943.3
申请日:2022-11-01
Applicant: 常州大学
IPC: C08J3/24 , C08L25/08 , C08L33/12 , C08K5/31 , C08F212/08 , C08F212/14 , C08F220/14 , C08F220/06
Abstract: 本发明属于功能聚合物合成领域,具体涉及一种室温制备交联聚合物的方法。将乙烯基单体与4‑乙烯基苄化物经引发剂引发进行自由基聚合得到带卤素基团的聚合物。带卤素基团的聚合物,在N,N‑二甲基甲酰胺等极性溶剂下,加入1,1,3,3‑四甲基胍,在室温下搅拌反应1个小时以上得到交联产物。本发明方法操作简单,反应条件温和,能耗低,单体适用性强,可用于规模化生产。
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公开(公告)号:CN114752584A
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202210409302.9
申请日:2022-04-19
Applicant: 常州大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/00 , C12P19/02 , C12P19/04 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因克隆,定点突变,基因重组技术,具体公开了从阿维链霉菌中克隆的新的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶(SaCsn46A)的突变体,该酶由271个氨基酸组成,其中包含34个氨基酸信号肽。通过分析该酶蛋白结构上的高去折叠自由能位点,以此选择突变位点进行突变,筛选出温度稳定性提高的壳聚糖酶突变体。本发明将原始酶SaCsn46A第237位甘氨酸突变为丙氨酸(G237A),将突变体在大肠杆菌Rosetta中进行表达。通过与野生型壳聚糖酶比较,发现突变酶的温度稳定性相比于野生菌型的温度稳定性提高了4.8倍。薄层色谱分析结果表明,该酶水解产物主要为氨基葡萄糖GlcN和(GlcN)2。
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公开(公告)号:CN113897343A
公开(公告)日:2022-01-07
申请号:CN202111062610.0
申请日:2021-09-10
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于生物发酵工程领域,具体公开了一种黑曲霉固态发酵产果胶酶的方法。本发明通过从不同土壤中筛选出产果胶酶性能较好的菌株黑曲霉,再设置培养基组分固体基质、金属离子及其浓度、含水量,培养温度、pH、装料量,建立单因素试验和正交试验从而得到菌株产酶最高的培养基组分和培养条件。本发明提供的黑曲霉固态发酵产果胶酶的方法,大大提高了菌株产酶能力,达到理想目标。
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公开(公告)号:CN113512515A
公开(公告)日:2021-10-19
申请号:CN202110774387.6
申请日:2021-07-08
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于微生物菌剂技术领域,特别涉及一种氨氧化复合菌剂及其制备方法和应用。通过将脱氮副球菌TD‑10、戈登氏菌TD‑46和粪产碱菌TD‑94三株高效氨氧化细菌进行复配,获得一种新型氨氧化复合菌剂CCZU C6。本发明的复合菌剂具有脱氮速率高、抗环境能力强等优点,投加该复合菌剂48小时后,氨氮由初始的155.8mg/L降至0.9mg/L,氨氮降解速率达到了77.4mg/L·d‑1,氨氮去除率达到了99%,可广泛应用于煤化工污水、发酵污水、化工与制药类生产污水等高氨氮污水处理。
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公开(公告)号:CN110643516A
公开(公告)日:2020-01-03
申请号:CN201910980977.7
申请日:2019-10-16
Applicant: 常州大学
Abstract: 本发明属于生物发酵工程领域,具体公开了一种高产脂肪酶酶活菌株的筛选方法。采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变菌株,在致死率为70-90%的条件下成功筛选出一株酶活高达73.33U/g的产酶菌株。并通过后续优化试验确定菌株最适的培养基组分以及生长条件:豆粕20g,初始含水量68%,葡萄糖含量3%,蛋白胨含量1%,猪油含量5%,CaCl2 0.04%,FeCl3 0.04%,接种量4%,培养温度28℃,培养3天后酶活高达93.33U/g,大大提高了菌株产酶能力,达到理想目标。