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公开(公告)号:CN114940963B
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202210175704.7
申请日:2022-02-25
申请人: 山东大学 , 青岛蔚蓝生物集团有限公司
摘要: 本发明涉及一种高效表达褐藻酸裂解酶的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。所述枯草芽孢杆菌工程菌包含重组质粒和表达宿主;重组质粒包含目的基因、信号肽以及表达载体;目的基因为褐藻胶裂解酶基因;信号肽为SaprE基因,其核苷酸序列如SED ID NO.5所示,氨基酸序列如SED ID NO.15所示,该菌株已于2021年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC No:M20211414,地址:中国,武汉,武汉大学。本发明强化了褐藻胶裂解酶的表达,胞外分泌酶活可达到8.76U/mL,是褐藻胶裂解酶自身信号肽表达褐藻酸裂解酶酶活的2.5倍,可应用于褐藻胶的生物降解。
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公开(公告)号:CN114921390B
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202210175702.8
申请日:2022-02-25
申请人: 山东大学 , 青岛蔚蓝生物集团有限公司
IPC分类号: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/66 , C12N15/90 , C12N15/01 , C12N13/00 , C12N15/60 , C12N9/88 , C12R1/125
摘要: 本发明涉及一株生产褐藻胶裂解酶的枯草芽孢杆菌突变株及其构建方法与应用。该菌株于2021年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC No:M20211413,地址:中国,武汉,武汉大学。所述生产褐藻胶裂解酶的枯草芽孢杆菌突变株ZPL23是以枯草芽孢杆菌工程菌ZPL为出发菌株,通过紫外诱变的方法筛选获得。该突变菌株摇瓶发酵上清液中褐藻胶裂解酶酶活高达12.27U/mL,比出发菌株提高了117%,有利于降低褐藻胶裂解酶的生产成本,可广泛应用于褐藻胶的生物降解,生产单糖,促进该酶在食品工业及医药领域中的广泛应用。
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公开(公告)号:CN114940963A
公开(公告)日:2022-08-26
申请号:CN202210175704.7
申请日:2022-02-25
申请人: 山东大学 , 青岛蔚蓝生物集团有限公司
摘要: 本发明涉及一种高效表达褐藻酸裂解酶的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。所述枯草芽孢杆菌工程菌包含重组质粒和表达宿主;重组质粒包含目的基因、信号肽以及表达载体;目的基因为褐藻胶裂解酶基因;信号肽为SaprE基因,其核苷酸序列如SED ID NO.5所示,氨基酸序列如SED ID NO.15所示,该菌株已于2021年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC No:M20211414,地址:中国,武汉,武汉大学。本发明强化了褐藻胶裂解酶的表达,胞外分泌酶活可达到8.76U/mL,是褐藻胶裂解酶自身信号肽表达褐藻酸裂解酶酶活的2.5倍,可应用于褐藻胶的生物降解。
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公开(公告)号:CN114921390A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210175702.8
申请日:2022-02-25
申请人: 山东大学 , 青岛蔚蓝生物集团有限公司
IPC分类号: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/66 , C12N15/90 , C12N15/01 , C12N13/00 , C12N15/60 , C12N9/88 , C12R1/125
摘要: 本发明涉及一株生产褐藻胶裂解酶的枯草芽孢杆菌突变株及其构建方法与应用。该菌株于2021年11月15日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC No:M20211413,地址:中国,武汉,武汉大学。所述生产褐藻胶裂解酶的枯草芽孢杆菌突变株ZPL23是以枯草芽孢杆菌工程菌ZPL为出发菌株,通过紫外诱变的方法筛选获得。该突变菌株摇瓶发酵上清液中褐藻胶裂解酶酶活高达12.27U/mL,比出发菌株提高了117%,有利于降低褐藻胶裂解酶的生产成本,可广泛应用于褐藻胶的生物降解,生产单糖,促进该酶在食品工业及医药领域中的广泛应用。
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公开(公告)号:CN114672522B
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202210367611.4
申请日:2022-04-08
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一种双酶催化N‑乙酰‑D‑葡萄糖酸内酯生产2‑酮基‑3‑脱氧‑D‑葡萄糖酸的方法。所述方法是以N‑乙酰‑D‑葡萄糖酸内酯为底物,向N‑乙酰‑D‑葡萄糖酸内酯中加入脱乙酰酶OngB和脱氨酶OngC,反应1~24h,得到2‑酮基‑3‑脱氧‑D‑葡萄糖酸。本发明构建了分别含有脱乙酰酶基因ongB和脱氨酶基因ongC的工程菌,再通过这两株工程菌制备得到重组蛋白OngB和OngC,进而双酶催化转化N‑乙酰‑D‑葡萄糖酸内酯得到2‑酮基‑3‑脱氧‑D‑葡萄糖酸,一方面解决了N‑乙酰‑D‑葡萄糖酸内酯难降解利用的问题,另一方面所得的2‑酮基‑3‑脱氧‑D‑葡萄糖酸具有广泛的工业用途,是合成工业上重要的呋喃衍生物、除草剂和食品添加剂等化合物的重要中间代谢产物,存在很高的经济价值。
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公开(公告)号:CN112626051B
公开(公告)日:2022-11-04
申请号:CN202110074436.5
申请日:2021-01-20
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一种1,3/1,4‑木聚糖酶MLX1034及其编码基因与应用。本发明中的1,3/1,4‑木聚糖酶MLX1034,分离自极地杆菌(Polaribacter sp.)Q13,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的1,3/1,4‑木聚糖酶MLX1034可以高效、特异性地降解1,3/1,4‑木聚糖,产生聚合度大于1的低聚木糖,并且理化性质稳定,可以在室温下进行反应,适合广泛应用于红藻低聚木糖的工业生产中,能够有效降低生产过程中的能源成本。
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公开(公告)号:CN115261239A
公开(公告)日:2022-11-01
申请号:CN202210891311.6
申请日:2022-07-27
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一种peptaibols类抗菌肽的诱导生产方法。包括:(1)活化培养拟康宁木霉SMF2;(2)活化培养病原菌;(3)将培养后的病原菌添加至NA固体培养基中,再将活化后的拟康宁木霉SMF2转接至NA固体培养基表面,得到共培养产物;(4)从共培养产物中提取得到粗提物,再将粗提物分离和纯化后,得到peptaibols类抗菌肽。本发明提供的方法将拟康宁木霉SMF2和病原菌在同一培养基上共培养,能够有效诱导能够诱导拟康宁木霉SMF2次级代谢产物peptaibols类抗菌肽‑康宁霉素的产生,每毫升培养基能产生0.3166~0.3395mg的peptaibols类抗菌肽,显著提高了peptaibols类抗菌肽的产量。
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公开(公告)号:CN113293114B
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202110708774.X
申请日:2021-06-25
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一株交替单胞菌HT1及其培养方法与应用。本发明中交替单胞菌(Alteromonas sp.)HT1,2021年3月9日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址:湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山,保藏编号CCTCC NO.M 2021217。交替单胞菌(Alteromonassp.)HT1可以在以浒苔为唯一碳源的培养基中生长,降解浒苔多糖所得到的产物为浒苔寡糖,主要以二糖、三糖、四糖和五糖的形式存在。该菌株及其所分泌的浒苔多糖裂解酶可以应用于海洋绿藻降解及功能性低聚寡糖的制备,在医药、化妆品以及食品行业等都具有较好的应用潜力。
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公开(公告)号:CN110736705B
公开(公告)日:2021-11-16
申请号:CN201911056720.9
申请日:2019-10-31
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法。本发明将差向异构酶加入到二肽对映异构体初始溶液中进行催化反应,利用圆二色光谱检测催化反应前后二肽对映异构体溶液的CD信号强度变化,若有变化,代表差向异构酶有活性,若无变化,代表差向异构酶无活性。本发明利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法无需衍生反应、操作简便、重现性好、误差范围小、灵敏度高、线性范围宽、连续可测、可用于原位检测,为手性识别的研究提供了一个新的领域。
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公开(公告)号:CN109401985B
公开(公告)日:2021-10-26
申请号:CN201811169375.5
申请日:2018-10-08
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及一株高产peptaibols抗菌肽的ΔTlrgt2木霉工程菌及其构建方法与应用。本发明通过Tlrgt2基因上下游同源臂序列、潮霉素抗性基因hph序列构建Tlrgt2敲除载体,采用基因敲除的方法制备得到ΔTlrgt2木霉工程菌株,敲除Tlrgt2基因,可以有效地提高菌株的peptaibols抗菌肽生产能力。本发明构建的ΔTlrgt2木霉工程菌可以稳定传代,并能够显著提高木霉peptaibols抗菌肽的产量,ΔTlrgt2木霉工程菌peptaibols抗菌肽产量比出发菌株提高约12倍,因此本发明有助于木霉peptaibols抗菌肽在医药和农业上的应用。
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