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公开(公告)号：CN110007077B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN201910265839.0
申请日：2019-04-03
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N7/08 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒琼扩抗原及其用于抗体检测的检测方法。所述琼扩抗原是将第28代猪流行性腹泻病毒SD株的病毒液接种Vero细胞进行大量增殖，收集病毒培养物，冻融3次，加入聚乙二醇辛基苯基醚处理后，离心取上清，上清经超速离心，获得猪流行性腹泻病毒琼扩抗原。本发明工艺方法简单、科学，生产稳定，成本低廉，制成的猪流行性腹泻病毒琼扩抗原具有敏感性高、特异性强、稳定性好等特点。本发明琼扩抗原用于猪流行性腹泻病毒抗体的检测方法为猪流行性腹泻病毒抗体琼脂扩散试验检测方法。有较高的阳性检出率，且具有实验操作要求低、检测成本低等特点，特别适宜基层兽医检疫检验部门和养殖场使用。
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公开(公告)号：CN109943521A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910307643.3
申请日：2019-04-17
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种适用于猪流行性腹泻病毒培养的仔猪肠道上皮细胞快速制备方法。包括以下步骤：取新生仔猪小肠肠道，剪成肠断，纵向剖开，用磷酸盐缓冲液反复清洗；刮取肠腔面的肠上皮组织用DMEM/F12不完全培养基分散细胞团，离心清洗细胞；用DMEM/F12完全培养基悬浮细胞，调整细胞团密度，在37℃浓度5%二氧化碳气体条件下培养，得到生长成片细胞团；加入胰酶消化液，进行细胞纯化，纯化过程可反复进行，直至得到生长状态良好的仔猪肠道上皮细胞。本发明通过肠腔面的机械分离和纯化得到生长状态良好的仔猪肠道上皮细胞，所获得的肠道上皮细胞适用于猪流行性腹泻病毒培养，为研究猪流行性腹泻病毒感染对仔猪肠道上皮细胞的细胞和分子机制提供快速的技术方案。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110007077A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910265839.0
申请日：2019-04-03
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒琼扩抗原及其用于抗体检测的检测方法。所述琼扩抗原是将第28代猪流行性腹泻病毒SD株的病毒液接种Vero细胞进行大量增殖，收集病毒培养物，冻融3次，加入聚乙二醇辛基苯基醚处理后，离心取上清，上清经超速离心，获得猪流行性腹泻病毒琼扩抗原。本发明工艺方法简单、科学，生产稳定，成本低廉，制成的猪流行性腹泻病毒琼扩抗原具有敏感性高、特异性强、稳定性好等特点。本发明琼扩抗原用于猪流行性腹泻病毒抗体的检测方法为猪流行性腹泻病毒抗体琼脂扩散试验检测方法。有较高的阳性检出率，且具有实验操作要求低、检测成本低等特点，特别适宜基层兽医检疫检验部门和养殖场使用。
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公开(公告)号：CN109820923A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910265838.6
申请日：2019-04-03
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: A61K36/855 , A61P1/12 , A61K9/14 , A61K9/00 , A61K35/618
Abstract: 本发明公开了一种治疗猪流行性腹泻的中草药组合物。由下列重量份的原料药制成：苦参3份、吴茱萸2份、栀子2份、珍珠母2份、石榴皮1份、枳壳1份、苍术1份、甘草1份、大青叶1份；按常规制药工艺，制成散剂或汤剂。本发明中草药组合物用于治疗猪流行性腹泻，安全，绿色，毒副作用小，无药物残留，不易产生耐药性，其对多种腹泻病原的生长与繁殖具有抑制作用；组方中各位中药功效既有协同，又有相互补充，以清热燥湿、止泻为主，理气宽中、健脾益气为辅，治疗猪流行性腹泻功效显著，而且取材方便，价格便宜，制备工艺简单易操作，有利于在规模化养殖场推广应用。
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公开(公告)号：CN117431339A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311437646.1
申请日：2023-11-01
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请公开了一种对含非洲猪瘟病毒的多种猪疫病毒同时检测引物组和方法。该引物组由特异性地针对非洲猪瘟病毒P72基因、猪瘟病毒5’UTR基因、猪繁殖与呼吸道综合征病毒ORF6基因、猪圆环病毒2型的Rep基因和猪伪狂犬病毒的gB基因的引物对组成。基于上述引物对，本发明建立了非洲猪瘟病毒及其他四种类症病毒的多重PCR检测方法。该方法的特异性和重复性好，对非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒、猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的最低检测限分别为1×101、1×101、1×103、1×104和1×104copies/μL；可为非洲猪瘟及其他难以临床区别的病毒性类症提供高效、快速和准确的鉴别手段。
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公开(公告)号：CN117535449A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311709515.4
申请日：2023-12-13
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域，公开了一种非洲猪瘟病毒及其四种类症病毒多重荧光PCR检测引物探针组、试剂盒及应用，该引物探针组包括检测非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病病毒2型的引物对和探针。本发明能够同时对非洲猪瘟病毒及其四种类症病毒进行快速检测，且具有良好的特异性、敏感性和重复性，对非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病病毒2型的质粒标准品最低检出限仅为101数量级，为非洲猪瘟及其难以临床区别的病毒性类症的鉴别诊断提供高效、快速和准确的技术手段。
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公开(公告)号：CN109943537A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910293949.8
申请日：2019-04-12
Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用于公鸡精液中白血病病毒分离的处理液及制备方法。所述的处理液主要成分为：8g/L氯化钠、0.2g/L氯化钾、1.44g/L磷酸氢二钠、0.24g/L磷酸二氢钾、500～1000kU/L青霉素、0.5～1g/L链霉素、1～2mg/L两性霉素B、10～15mg/L恩诺沙星。所述上述试剂依次加入溶剂瓶，加入蒸馏水溶解、混匀、定容，将溶液用0.22um滤膜过滤除菌后低温保存。使用时将公鸡精液和处理液按1:4的比例混匀后4℃环境下孵育30min，8000r/min离心5分钟取上清接种细胞，用于禽白血病病毒分离。使用本处理液可有效减少公鸡精液接种细胞造成的污染，增加病毒分离的成功率，有利于禽白血病病毒的检测。
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