公开(公告)号：CN107148941A

公开(公告)日：2017-09-12

申请号：CN201710223891.0

申请日：2017-04-07

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 李玉 ,  王一君 ,  吴金节 ,  陶焕青 ,  宛晓春

IPC: A01K67/02 ,  A23K50/40

CPC classification number: A01K67/02 ,  A23K50/40

Abstract: 本发明公开了一种高脂血症模型的造模方法，包括以下步骤：选取实验幼犬，正常饲喂1周后，饲喂高脂日粮造模，每日两次喂食；高脂日粮包括：74％基础饲料、10％猪油、5％蔗糖、5％成年奶粉、5％蛋黄粉和1％胆固醇；在造模后7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，分别称重，前肢静脉采血取血清，测量血液中TG、TC、LDL‑C和HDL‑C含量，于造模第84天，抽取抗凝血，测量血液流变学指标；每组随机选取三只犬，进行宰杀，取肝脏组织，进行组织病理学超微结构观察，确定模型是否成功；本方法具有造模方法简单，与人体发病机理相近，可重复率高等特点。

公开(公告)号：CN106978388A

公开(公告)日：2017-07-25

申请号：CN201710229606.6

申请日：2017-04-10

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 李玉 ,  陶焕青 ,  吴金节 ,  王希春 ,  冯士彬 ,  李锦春 ,  梁婷 ,  徐怡钟

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/067 ,  C12N2500/38 ,  C12N2500/84 ,  C12N2501/30 ,  C12N2501/33 ,  C12N2509/00

Abstract: 本发明属于细胞分离与培养领域，具体涉及一种犬肝细胞的分离与培养方法，包括如下步骤：S1,活体取肝；S2,灌流；S3,肝细胞分离；S4，肝细胞培养。所述灌流是指向冲洗后的肝脏灌注37℃预热的灌流液A 15‑20min，流速为50ml/min，然后继续以50ml/min的流速灌注37℃预热的灌流液B3‑5min，接着以20ml/min流速灌注37℃预热的灌流液C 4‑6min，最后将含有三抗的4℃预冷的基础培养基浇在肝脏表面上，所述三抗与基础培养基的体积比为1:99。此法分离获得的肝细胞几乎为纯的肝实质细胞，不仅数量多，肝细胞形态完整，贴壁良好，活性高，而且保留了肝细胞的各种功能。