一种用于在靶位点-4位实现A/T精准替换的基因序列及替换方法

    公开(公告)号:CN117384948A

    公开(公告)日:2024-01-12

    申请号:CN202311283988.2

    申请日:2023-09-28

    Abstract: 本发明提供了一种用于在靶位点‑4位实现A/T精准替换的基因序列及替换方法。本发明在单一载体上导入NmCas9和SpCas9双表达框,实验证明,利用SpCas9在植物中相对偏好碱基缺失和NmCas9相对偏好单碱基插入,在共切点的基因组靶标上引入适配SpCas9的靶标sgRNA和适配NmCas9的且靶标序列带有‑4位单碱基缺失的sgRNA,进而构建水稻靶向编辑载体,导入水稻细胞后可以造成水稻在该位点‑4位任意单碱基高频替换A或T,从而实现有DSB无模板的植物基因组精准单碱基替换。

    一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE-CBE系统及其应用

    公开(公告)号:CN119391758A

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202411610304.X

    申请日:2024-11-12

    Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域,具体涉及一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统及其应用。本发明提供的水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统,包括共转录单元基因ABE‑CBE,所述共转录单元基因ABE‑CBE包括腺嘌呤脱氨酶的编码基因ABE8e和胞嘧啶脱氨酶的编码基因Sdd7,并将所述共转录基因ABE‑CBE中的编码基因ABE8e和编码基因Sdd7构建于同一表达载体中。本发明通过设计的ABE‑CBE系统,不仅可以在相同位点介导两种编辑器同时发挥作用,而且能够进一步的减少非预期碱基替换的产生,提高碱基编辑器的编辑效率,具有广泛的应用价值。

Patent Agency Ranking