公开(公告)号：CN104673916A

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201510080249.2

申请日：2015-02-12

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 丁月云 ,  殷宗俊 ,  周杰 ,  张晓东 ,  刘力源 ,  张威 ,  张淑静 ,  黄龙 ,  张梦琦 ,  付坤

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明公开了一种家猪印记基因Rasgrf1的鉴定方法，包括如下步骤：(1)采用PCR-SSCP-PAGE的方法查找外显子序列SNP；(2)总RNA的提取和cDNA的制备；(3)采用RT-PCR-RFLP方法鉴定印记状态；(4)目的基因蛋白水平的检测：包括石蜡组织切片的制作和免疫荧光观察；(5)亚硫酸氢盐修饰后测序的甲基化分析方法：确定猪Rasgrf1基因核心启动子区及该片段内CTCF结合区域GpG岛的分布情况，样品经亚硫酸盐处理后，设计特异性引物对其进行PCR扩增，而后测序进行甲基化分析。通过本发明所述方法对猪的Rasgrf1基因印记机制进行初步探讨，为皖南黑猪优良性状的开发和利用提供了依据。

公开(公告)号：CN104913983A

公开(公告)日：2015-09-16

申请号：CN201510270751.X

申请日：2015-05-25

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 丁月云 ,  殷宗俊 ,  周杰 ,  张淑静 ,  刘力源 ,  张晓东 ,  朱宏宇 ,  黄龙 ,  吴涛 ,  张威

IPC: G01N3/24 ,  G01N1/04 ,  G01N30/06 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种安徽地方猪种肉质性状候选基因的筛选方法，包括如下步骤：(1)对照动物模型的选择；(2)样品采集：猪屠宰后，取背最长肌、心脏及肝脏组织；(3)常规肉质指标测定：检测背最长肌肉色、pH值和嫩度；(4)色谱法测定背最长肌IMP含量；(5)索氏抽提法测定背最长肌IMF含量；(6)RT-PCR方法检测IMP和IMF形成过程中关键基因在猪肝脏、心脏和背最长肌的表达水平，并进行数据的统计分析。本发明所述方法操作简便、成本低、检测效果理想。