一种对硝基苄基酯酶突变体及应用

    公开(公告)号:CN113201516A

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN202110465504.0

    申请日:2021-04-28

    IPC分类号: C12N9/18 C12N15/55 C12P17/16

    摘要: 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在:①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂,酶催化活性维持较高水平;②在无助溶剂体系下,突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应,并以10~200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物,进行水解拆分制备l‑薄荷醇,结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70%,产物l‑薄荷醇的eep值>95%,表现出良好的工业应用性能。

    一种对硝基苄基酯酶突变体及应用

    公开(公告)号:CN113201516B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202110465504.0

    申请日:2021-04-28

    IPC分类号: C12N9/18 C12N15/55 C12P17/16

    摘要: 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在:①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂,酶催化活性维持较高水平;②在无助溶剂体系下,突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应,并以10~200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物,进行水解拆分制备l‑薄荷醇,结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70%,产物l‑薄荷醇的eep值>95%,表现出良好的工业应用性能。

    共沸精馏制备无萜薄荷素油的方法

    公开(公告)号:CN104178347B

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201410393055.3

    申请日:2014-08-11

    IPC分类号: C11B9/02 C11B3/12

    摘要: 本发明公开了一种共沸精馏制备无萜薄荷素油的方法,包括以下具体步骤:在负压下,将薄荷素油抽入装有填料精馏柱的精馏塔内,再添加共沸剂,然后回流,分段收集馏分;在常压下,分离所述共沸剂得到馏分,根据馏分的含量,选择馏分进行调配,得到无萜薄荷素油。本发明提供的方法可有效地避免传统精馏方法能耗高、对体系的真空度要求高、蒸馏的底物易被高温碳化、原料损失较大、蒸馏出的物质含焦糊味的缺点;采用此方法制备的薄荷素油一方面对体系要求低,制备的成品无焦糊味,香气纯正,另一方面可通过调配制备无萜薄荷素油,丰富了产品的规格,满足了不同的需求,而且操作简便,适于工业上的大规模生产应用。

    一种乳酸薄荷酯的合成及提纯分离方法

    公开(公告)号:CN112409182A

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN202011382744.6

    申请日:2020-11-30

    摘要: 本发明提供一种乳酸薄荷酯的合成及提纯分离方法,包括以下步骤:步骤一,在装有温度计、油水分离器的三口烧瓶中依次加入L‑乳酸、L‑薄荷醇和催化剂,抽真空,加热逐步升温到60~80℃,保温脱水7~10h。本发明主要通过一锅法制备乳酸薄荷酯,在真空条件下,添加L‑乳酸,催化剂及L‑薄荷醇,升温,负压脱水一定时间,得到的乳酸薄荷酯粗品,滴加水后,分出下层水相,水相待回收乳酸,乳酸可负压浓缩脱水后回用。乳酸薄荷酯粗品经碳酸氢钠中和后,油相再经过水蒸气蒸馏,通过常压共沸蒸馏出未反应的薄荷醇,之后分水得到含量≥99.0%的乳酸薄荷酯,经结晶得到无色结晶状乳酸薄荷酯。

    一种合成L-薄荷脑的工业结晶方法

    公开(公告)号:CN106542966A

    公开(公告)日:2017-03-29

    申请号:CN201610890511.4

    申请日:2016-10-12

    IPC分类号: C07C29/78 C07C35/12

    CPC分类号: C07C29/78 C07C35/12

    摘要: 本发明提供一种合成L-薄荷脑的工业结晶方法,包括以下步骤:(1)制备结晶母液:将合成L-薄荷脑与溶剂A按照质量比为1:1-9:1的比例在50℃~70℃下加热溶解;(2)将母液结晶,将步骤(1)中制备的母液注入方锥体结晶桶中,采用缓慢梯度降温的方式生产出具有无色棱柱状或针状晶体,去除母液,干燥后即得无色或透明状棱柱状或针状晶体,同时结晶母液循环使用。本发明通过使用工业合成的合成L-薄荷脑获得了无色棱柱状或针状合成L-薄荷脑晶体,有效地避免了各种压缩成型合成L-薄荷脑沾粘及结块现象,相对于合成L-薄荷脑具有应用便捷,存储方便的优势。同时,这种合成L-薄荷脑结晶与天然L-薄荷脑外观完全一致,香气上更接近天然L-薄荷脑的香气。