公开(公告)号：CN113201516A

公开(公告)日：2021-08-03

申请号：CN202110465504.0

申请日：2021-04-28

申请人： 安徽丰乐香料有限责任公司 ,  浙江工业大学

发明人： 陈小龙 ,  王广强 ,  金晓 ,  胡军 ,  陆跃乐 ,  张翼轸 ,  朱林江 ,  陈志钢 ,  陈翰驰 ,  田雯 ,  朱俊峰

IPC分类号： C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12P17/16

摘要： 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70％，产物l‑薄荷醇的eep值>95％，表现出良好的工业应用性能。

公开(公告)号：CN113201516B

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202110465504.0

申请日：2021-04-28

申请人： 安徽丰乐香料有限责任公司 ,  浙江工业大学

发明人： 陈小龙 ,  王广强 ,  金晓 ,  胡军 ,  陆跃乐 ,  张翼轸 ,  朱林江 ,  陈志钢 ,  陈翰驰 ,  田雯 ,  朱俊峰

IPC分类号： C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12P17/16

摘要： 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70％，产物l‑薄荷醇的eep值>95％，表现出良好的工业应用性能。