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公开(公告)号:CN102230021A
公开(公告)日:2011-11-02
申请号:CN201110148284.5
申请日:2011-06-03
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了烟草环斑病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用,系选择烟草环斑病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含三对特异性引物,目标片段长度为217bp,引物序列为:Acatggggcccgtcattgattttttccacaaatcaagtaacgatggc、Gagttaaataatccaactatgacgtggcttttcattgatagatattatgaggcgaaaga,Ccagcccacgttgtacttt、Ttgatgggtcaacttccat,Ggcagtgtattgttaccatgc、Attcaattgggtgatactttcgc;本发明克服了常规RT-PCR费时、设备昂贵以及扩增后需电泳检测等缺点,可对样品中的TRSV进行快速准确的定性检测,具有成本低廉、简单易操作、结果直观、敏感性高和重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN101429562B
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN200810122322.8
申请日:2008-11-10
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了菜豆荚斑驳病毒荧光定量RT-PCR检测试剂及制备方法和应用,系选择菜豆荚斑驳病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为98bp,引物和探针序列为:引物:BPMV TF:5′-ttgatggcacaggaggaaatt-3′,BPMV TR:5′-acatgcattgctgtagcttgag-3′,探针:5′-FAM-tgtcttctagtgcaagtga-MGB-3′;本发明克服了常规RT-PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点,可对样品中的BPMV进行快速准确的定性与定量检测,具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN101407848A
公开(公告)日:2009-04-15
申请号:CN200810122324.7
申请日:2008-11-10
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了小麦线条花叶病毒荧光定量RT-PCR检测试剂及制备方法和应用,系选择小麦线条花叶病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为63bp,引物和探针序列为:引物:WSMV TF:5′-agctatttgcacaggcacga-3′,WSMV TR: 5′-ctgcatcatgacgtgagttgtc-3′,探针:5′-FAM-tgagtgcgggtactaatga-MGB-3′;本发明克服了常规RT-PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点,可对样品中的WSMV进行快速准确的定性与定量检测,具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN103088161A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310012184.9
申请日:2013-01-14
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了番茄环斑病毒的RT-LAMP检测方法,通过样品RNA提取,RT-LAMP扩增,就可以得到检测结果,整个检测反应只需1h~2.5h,又由于LAMP呈瀑布式扩增,因此其扩增效率非常高,灵敏度是RT-PCR检测的100倍,且无需复杂的检测仪器和检测过程,操作简单,可现场实时检测,因此本发明是一种检测速度快、操作简单、检测结果判断容易和灵敏度高的番茄环斑病毒的RT-LAMP检测方法。
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公开(公告)号:CN102230022A
公开(公告)日:2011-11-02
申请号:CN201110148678.0
申请日:2011-06-03
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用,系选择南芥菜花叶病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含三对特异性引物,目标片段长度为226bp,引物序列为:Ccccgttccattcactaacaactcttttattggtggtatggtcaaggg、Actggaatcaactgtttaaataccccgtttttagggggagcgaatttcaat,Taatacactcttgagttactatctagg、Taagcgcagtggagttcgat,Tgccataagtgcaagggct、Tgttacatcgaggaggatgg;本发明克服了常规RT-PCR费时、设备昂贵以及扩增后需电泳检测等缺点,可对样品中的ArMV进行快速准确的定性检测,具有成本低廉、简单易操作、结果直观、敏感性高和重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN101949936A
公开(公告)日:2011-01-19
申请号:CN201010245482.9
申请日:2010-08-02
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
IPC分类号: G01N33/68 , G01N33/558 , G01N33/531 , C12N15/40 , C12N15/70 , C07K16/10 , C07K16/06
摘要: 本发明公开了检测赤羽病抗体的胶体金试纸条及其制备方法,试纸条色括底衬,底衬上设置有吸水垫、硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和样品垫,硝酸纤维素膜上设置有检测带和质控带,检测带中包被有G1重组蛋白,质控带中包被有赤羽病抗体,玻璃纤维膜中包被有胶体金-G1重组蛋白,G1重组蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示;本发明具有检测简便、快捷、特异、敏感和成本低等优点;制备方法包括RNA制备、G1重组蛋白制备、胶体金-G1重组蛋白制备、赤羽病抗体制备和胶体金试纸条制备,该制备方法得到特异性好和敏感度高的本发明试纸条,该制备方法较简单,成本也较低。
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公开(公告)号:CN101429562A
公开(公告)日:2009-05-13
申请号:CN200810122322.8
申请日:2008-11-10
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了菜豆荚斑驳病毒荧光定量RT-PCR检测试剂及制备方法和应用,系选择菜豆荚斑驳病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为98bp,引物和探针序列为:引物:BPMV TF:5′-ttgatggcacaggaggaaatt-3′,BPMV TR:5′-acatgcattgctgtagcttgag-3′,探针:5′-FAM-tgtcttctagtgcaagtga-MGB-3′;本发明克服了常规RT-PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点,可对样品中的BPMV进行快速准确的定性与定量检测,具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN103088161B
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201310012184.9
申请日:2013-01-14
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了番茄环斑病毒的RT-LAMP检测方法,通过样品RNA提取,RT-LAMP扩增,就可以得到检测结果,整个检测反应只需1h~2.5h,又由于LAMP呈瀑布式扩增,因此其扩增效率非常高,灵敏度是RT-PCR检测的100倍,且无需复杂的检测仪器和检测过程,操作简单,可现场实时检测,因此本发明是一种检测速度快、操作简单、检测结果判断容易和灵敏度高的番茄环斑病毒的RT-LAMP检测方法。
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公开(公告)号:CN103088160B
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201310011970.7
申请日:2013-01-14
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了草莓潜隐环斑病毒的RT-LAMP检测方法,通过样品RNA提取,RT-LAMP扩增,就可以得到检测结果,整个检测反应不超过2.5h,又由于LAMP呈瀑布式扩增,因此其扩增效率非常高,灵敏度是RT-PCR检测的100倍,且无需复杂的检测仪器和检测过程,操作简单,可现场实时检测,因此本发明是一种检测速度快、操作简单、检测结果判断容易和灵敏度高的草莓潜隐环斑病毒的RT-LAMP检测方法。
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公开(公告)号:CN101768640B
公开(公告)日:2012-11-21
申请号:CN201010039737.6
申请日:2010-01-08
申请人: 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要: 本发明公开了河豚鱼成分荧光定量PCR检测试剂及其制备方法和应用,系选择不同种河豚鱼之间比较保守的细胞色素B基因片段为靶目标序列,经过精心设计并合成,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为102bp,引物和探针序列为:引物:Takifugu TF:5′-TCTTCACGAAACAGGCTCCAAC-3′,Takifugu TR:5′-GTGAAGCCCAGGAGGTCTTTGTA-3′,探针:5′-FAM-CGCAGACAAAATCCCATTCCACCCATA-TAMRA-3′;本发明是一种对混入鱼糜制品中的河豚鱼成分具有特异性高、敏感性强,快速检测的荧光定量PCR检测试剂;本发明的方法设计合理,定性准确。
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